Modificación de caracteres ligados a la domesticación en Cucurbita maxima. Utilización de la morfometría como herramienta para su identificación

A. B. Martínez et al. Domesticación en Cucurbita maxima 95 Acta Botanica Malacitana 40. 95-106 Málaga, 2015 MODIFICACIÓN DE CARACTERES LIGADOS A LA DOMESTICACIÓN EN CUCURBITA MAXIMA. UTILIZACIÓN DE LA MORFOMETRÍA COMO HERRAMIENTA PARA SU IDENTIFICACIÓN Analía B. MARTÍNEZ 1*; Sergio I. PEREZ 2, 5; Verónica S. LEMA3, 5 y Fernando LÓPEZ ANIDO 4 1 Infive, Universidad Nacional de La Plata. Diag 113 y 61. La Plata. Argentina 2 División Antropología, Facultad de Ciencias Naturales y Museo, Universidad Nacional de La Plata. Paseo del Bosque s/n. La Plata, Argentina 3 Laboratorio de Etnobotánica y Botánica Aplicada. División Arqueología, Facultad de Ciencias Naturales y Museo, Universidad Nacional de La Plata. Paseo del Bosque s/n. La Plata, Argentina 4Facultad de Ciencias Agrarias. Universidad Nacional de Rosario. Zavalla. Argentina 5Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas *Autor para correspondencia: [email protected] RESUMEN. Modificación de caracteres ligados a la domesticación en Cucurbita maxima. Utilización de la morfometría como herramienta para su identificación. El objetivo de este trabajo consiste en reconocer patrones de variación morfométrica –mediante la aplicación de análisis multivariado para tamaño y formaen semillas de C. maxima que sean diagnósticos para formas domesticadas, silvestres e híbridas actuales, a fin de aplicarlos a la identificación de semillas arqueológicas. Para lograr este objetivo se midieron con calibre digital 1317 semillas de las formas antedichas y de nueve sitios arqueológicos de Argentina y Perú. Se exploró el patrón de variación entre las mismas en tamaño y forma mediante análisis multivariado. Se identificó una tendencia general hacia la disminución de la variabilidad en forma y tamaño a lo largo del tiempo, con una primera etapa donde se mantuvieron ejemplares híbridos, generándose nuevas formas y una segunda donde se mantuvieron los rasgos de momentos previos y el aumento del tamaño de las semillas. Palabras clave. Cucurbita, domesticación, silvestre, híbrido SUMMARY. Modification of characters linked to Cucurbita maxima domestication. Using morphometry as a tool for identification. The aim of this paper is to recognize patterns of morphometric variation –through the application of multivariate analysis for size and shapein C. maxima seeds, which are diagnostic for current domesticated, wild and hybrid forms, in order to be applied to the identification of archaeological seeds. In order to achieve this aim, 1317 seeds were measured with digital caliber corresponding to the former forms and to nine archaeological sites from Argentina and Peru; patterns of variation among them were explored in both size and shape, employing multivariate analysis. A general trend in time towards diminution of variability in size and shape was identified with a first stage in which hybrid forms were maintained and new shapes were generated and a second stage in which features of previous moments were maintained and the size of the seeds were increased. Key words. Cucurbita, domestication, wild, hybrid. Recibido el 1 de mayo de 2015, aceptado para su publicación el 5 de septiembre de 2015 96 Acta Botanica Malacitana 40. 2015 INTRODUCCIÓN La selección artificial y la manipulación de individuos o poblaciones vegetales en función de las preferencias que las sociedades humanas tienen sobre ellas, ha provocado la variación de caracteres morfológicos y fisiológicos, entre otros, en diversas especies. Este tipo de prácticas puede dar lugar a poblaciones cultivadas y/o domesticadas. Estas últimas se caracterizan por una total dependencia de las plantas respecto del Hombre en las distintas etapas de su ciclo de vida (Casas et al. 1999). El género Cucurbita (familia Cucurbitaceae, subfamilia Cucurbitoideae) es estrictamente americano e incluye una serie variable de especies tanto silvestres como domesticadas cuyo número varía entre doce y veintiséis de acuerdo con las diferentes taxonomías que se tomen en cuenta (Whitaker & Bemis, 1976,Jeffrey, 1980, Nee, 1990, Lira Saade, 1995, Bisognin, 2002). Dado que la familia es esencialmente tropical, sus miembros se han adaptado bien a climas templados con baja incidencia de heladas, aunque se han desarrollado cultivares con tolerancia a bajas temperaturas y con capacidad para crecer rápidamente en suelos fríos (Whitaker, 1974). Todas ellas presentan frutos de tipo pepo, cuyas formas, tamaños y colores son muy variables. Son plantas de hábito mayormente herbáceo, con tallos rastreros y con fecundación cruzada (Whitaker, 1964). Es un género utilizado desde tiempos prehispánicos, con una gran cantidad de restos arqueológicos desde México a Argentina. Los hallazgos más tempranos (ca. 9000-8000 AP) se ubican entre la costa norte de Perú y la costa de Ecuador (Dillehay et al. 2007, Stothert et al. 2003). Las especies de este género son consideradas entre las primeras en el proceso de domesticación (Cutler, 1961) y poseen usos alimenticios, medicinales, ornamentales y para hacer artefactos. En Sudamérica las especies domesticadas son Cucurbita moschata (Duch ex Lam) Duch. ex Poir., Cucurbita maxima subsp. maxima Duch. ex Lam y Cucurbita ficifolia Bouché. Existiendo también en esta área formas espontáneas: Cucurbita maxima Duch. ex Lam. subsp. andreana (Naudin) Filov y Cucurbita ecuadorensis Cutler & Whitaker. C. maxima subsp. maxima se distribuye actualmente en gran parte de Sudamérica, es sensible a las heladas, y la más tolerante a las bajas temperaturas luego de C. ficifolia; puede tener hábito de enredadera o arbusto (C. maxima subsp. maxima cv. zapallito como arbustiva). Su fruto puede presentar una forma de “turbante” cuando el ovario queda por fuera del receptáculo y posee gran número de cultivares (Whitaker, 1974, Lira Saade, 1995, Bisognin, 2002). C. maxima subsp. andreana es una hierba anual muy variable en tamaño y de tallos rastreros (Ashworth & Galetto, 1999). Esta subespecie es muy propensa a variar, sobre todo en el tamaño de los frutos, los cuales pueden ser ovoides, oblongos, esféricos o deprimidos; su longitud varía de 6 a 21,5 cm (Millán, 1945, Martínez Crovetto, 1974, Ashworth, 1997). La mayoría de las poblaciones actuales de este taxón se ubican en el centro-este de Argentina y Uruguay (Nee, 1990, Lira Saade, 1995), aunque recientemente se han encontrado poblaciones en Bolivia (Andres & Nee, 2005) y Perú (Valega Rosas et al. 2004). En cuanto a sus relaciones evolutivas, gran cantidad de autores (Whitaker & Bemis, 1964), (Nee, 1990, Decker-Walters & Walters 2000, Sanjur et al. 2002) coinciden en señalar a subsp. andreana como el antecesor de subsp maxima. Si bien estos autores proponen la zona comprendida entre el sur de Perú-Bolivia – Noroeste argentino (NOA) como área de origen, la evidencia arqueológica no lo corrobora aún. Esto se debe a que es posible encontrar en los mismos contextos arqueológicos, restos de la subespecie silvestre junto a la domesticada y a formas que comparten caracteres entre ambas subespecies (Lema, 2009a). Indagar sobre relaciones evolutivas, de A. B. Martínez et al. Domesticación en Cucurbita maxima 97 origen y domesticación a través de la morfología de semillas actuales y arqueológicas en el género Cucurbita, cuenta con bastos antecedentes para los miembros norteamericanos del género y muy pocos para aquellos de Sudamérica (Lema, 2009a). Generalmente se ha recurrido al empleo de medidas lineales tales como largo, ancho y espesor de las semillas para diferenciar formas silvestres de domesticadas (Decker & Wilson, 1986, Cowan & Smith, 1993, Newsom et al. 1993, Cowan, 1997, Smith 2000, 2006), asumiéndose que existe una tendencia a que las semillas aumenten de tamaño a través de la evolución bajo domesticación. En el caso particular de Cucurbita spp. se planteó que el aumento en el tamaño (largo) podía ser el resultado de la selección cultural dirigida, hacia semillas más grandes dado que las mismas eran consumidas (Decker & Wilson, 1986), o bien que semillas más grandes están indirectamente reflejando la selección de frutos de mayor tamaño, considerando una correlación entre tamaño de semilla y de fruto (Cowan, 1997). En este sentido Bisognin (2002) invierte los términos, afirmando que la selección de semillas más grandes pudo haber resultado en frutos más grandes. Semillas más grandes poseen embriones de mayor tamaño, lo cual es una ventaja adaptativa para la germinación en medios antrópicos (Decker & Wilson, 1986). En términos generales, la etapa inicial de domesticación estaría caracterizada por una tendencia a la disminución en el coeficiente de variación (CV) respecto de las poblaciones silvestres, luego este tenderá a aumentar por la coexistencia de formas silvestres y otras que exhiben rasgos novedosos, malezoides e híbridos, y con el tiempo la variabilidad disminuiría por la presencia de fuertes presiones selectivas ligadas a la domesticación. Pero con la generación de diversos cultivares, la diversidad aumentaría nuevamente a nivel específico, si bien debido a que los cultivares tenderán a ser muy uniformes en sus características, la variabilidad intrínseca de los mismos será baja (Gremillion, 1993). Cowan & Smith (1993) registran un CV de entre 5,4 para largo y 6,6 para ancho en semillas de una población de morfotipo silvestre de C. pepo L. Para estos y otros autores (Gremillion, 1993, Newsom et al. 1993) estos valores de CV bajos indican homogeneidad morfológica. Estos valores aumentarán con la domesticación por la presencia de más de un tipo de fruto y/o los efectos iniciales de la hibridación, cultivo y cría selectiva (Newsom, 1993). Por ende, un aumento en el CV o un CV alto en conjuntos arqueológicos puede indicar la presencia de un taxón domesticado con variedades de frutos de morfología muy diferente (Cowan & Smith, 1993). La persistencia de una alta variabilidad a lo largo de una secuencia arqueológica señala además que ciertas prácticas tales como el aislamiento reproductivo y la cría selectiva estaban limitadas en frecuencia o grado (Gremillion, 1993). El análisis de cultivares de ssp. maxima ha indicado que estas tendencias no siempre se dan, ya que ciertos cultivares locales pueden tener valores de CV elevados; además el empleo de medidas lineales, índices, CV y análisis de conglomerado, no reflejan las clasificaciones y agrupamientos locales de variedades de zapallo (Lema, 2009 b). Cuando las medidas de los ejemplares arqueológicos poseen un valor intermedio al registrado entre poblaciones silvestres y domesticadas, o bien cuando el rango de medidas de ejemplares arqueológicos abarca el de ambas poblaciones actuales, se interpreta que se está ante formas malezoides resultado de la hibridación entre poblaciones silvestres y domesticadas (Gremillion, 1993) o ante formas transicionales en un continuum de transformaciones (Pearsall, 1989, Hillman & Davies, 1990). El primero de los casos mencionados es el que hasta ahora se considera, en relación a los complejos subsp. maxima –subsp. andreana en el registro arqueológico del NOA, a partir de análisis uni y bivariados a nivel morfológico de semillas y a nivel 98 Acta Botanica Malacitana 40. 2015 anatómico en las testas de las mismas (Lema, 2009a). Varios autores consideran que en poblaciones vegetales silvestres la forma es menos variable y está menos sujeta a factores ambientales que el tamaño, por lo cual es más adecuado el uso de índices que el de medidas lineales (Mangafa & Kotsakis, 1996). Esto se aplicaría particularmente a las semillas ya que en las mismas la forma es un rasgo genético más conservador que el tamaño (Kay et al. 1980). Los análisis morfométricos realizados en poblaciones actuales de diversas especies demuestran que este tipo de aproximación resulta ser apropiada para determinar patrones de similitud o de variación morfológica en frutos y semillas procedentes de poblaciones sujetas a diversas prácticas de manejo cuando se aplican análisis multivariados (Colunga García, 1984, Casas & Caballero, 1996, Casas et al. 1999, Casas, 2001, Aguirre-Dugua et al. 2012, 2013, Rodríguez Morales et al. 2013). Estudios previos en el género constatan una tendencia al aumento del tamaño de las semillas, sin embargo, la ausencia de estudios morfométricos en poblaciones híbridas generadas bajo cruzamientos controlados, dificulta el avance en la comprensión de la historia evolutiva del taxa, quedando ésta enmarcada en dos grandes esferas (silvestre – domesticado), sin que se analice con mayor detalle los procesos de hibridación que pudieron existir a lo largo del tiempo. Este último aspecto es sobre el que se centra este trabajo, considerando que hasta el presente sólo se cuenta con ejemplares arqueológicos de la forma domesticada en restos de semillas, estando la forma silvestre representada sólo por restos arqueológicos de pericarpio (Lema, 2009a). El objetivo de este trabajo consiste en reconocer patrones de variación morfométrica –mediante la aplicación de análisis multivariado para tamaño y formaen semillas de C. maxima Taxa Código UNR Fuente* Código Banco Germoplasma Nombre común Origen C. maxima ssp. maxima 56 GRIN PI 234608 Queensland Blue South Africa C. maxima ssp. maxima 93 Feltrin Sementes -Bobrincha de tronco Redonda Verde Brasil C. maxima ssp. maxima 153 Semillas CAPS -Zapallo Gris Plomo Argentina C. maxima ssp. andreana 130 IPK MAX 81 ssp. andreana Argentina (Entre Ríos) C. maxima ssp. andreana 140 Colector Pablo López Anido UNR 140 Argentina (Santiago del Estero) C. maxima ssp. andreana 160 GRIN G 29254 ssp. andreana Argentina (Córdoba) Tabla 1. Accesiones parentales empleadas en los cruces experimentales, parental accesión involved in the experimental crosses, GRIN, Germplasm Resources Information Network USA (http://www.ars-grin. gov),Feltrin Sementes, Brazil (http://www.sementesfeltrin.com.br/produtos-categoria-abobrinha), Semillas CAPS (Compañía Argentina Productora de Semillas) (http://www.semillascaps.com.ar), IPK Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research, Gatersleben, Germany (http://www.ipk-gatersleben.de/Internet). A. B. Martínez et al. Domesticación en Cucurbita maxima 99 que sean diagnósticos para formas domesticadas, silvestres e híbridas actuales, a fin de aplicarlos a la identificación de semillas arqueológicas. Este objetivo se enmarca en los intereses de un proyecto de investigación multidisciplinario enfocado en la reconstrucción de la historia de la domesticación del zapallo criollo, C. maxima subsp. maxima, a partir de su antecesor silvestre (subsp. andreana). Las aproximaciones llevadas a cabo en este proyecto han sido cuatro: el cultivo experimental de ambas subespecies y la producción controlada de híbridos, ensayos fisiológicos sobre las generaciones obtenidas, estudios morfométricos sobre semillas actuales de ambas subespecies e híbridos y el estudio de restos vegetales recuperados en sitios arqueológicos de Argentina y Perú. MATERIALES Y MÉTODOS Las semillas analizadas corresponden a tres grandes grupos: 1) Cruces experimentales. Material vegetal actual de las subespecies C. maxima subsp. maxima, C. maxima subsp. andreana y cruces entre ambas (generaciones F1 y F2), fueron generados en el campo experimental Villarino de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Rosario (Zavalla, Argentina) bajo condiciones controladas durante los años 2012, 2013 y 2014. Se emplearon tres accesiones por cada parental (tab. 1).A modo de ejemplo se indica la orientación de los cruces controlados (fig. 1). La generación F1 consistió en cruces que involucraron a ambas especies como parental pistilado; la generación F2 incluye cruces entre F1 o de F1 con alguno de sus parentales. 2) Colección de referencia. Material vegetal actual de las subespecies maxima y andreana. En el caso de la primera se incluyen tres cultivares comerciales (Inglés, Criollo y Hubbard) cedidos por la Cátedra de Horticultura (Facultad de Figura 1: Gráfico que representa a modo de ejemplo, un cruce experimental realizado entre accesiones de la subespecie silvestre (130) y la subespecie domesticada (93).Posteriormente se obtiene la primer generación -F1- (130 x 93).En este caso a las plantas femeninas (híbridas) se las cruza con formas masculinas silvestres (130) ó domesticadas (93) o inclusive con plantas de genotipo similar al femenino (Back Cross) obteniendo así la generación F2. Graph showing, by way of example, an experimental cross made between the wild subspecies accessions (130) and the domesticated subspecies (93). Subsequently, -F1the first generation (130 x 93) is obtained. In this case, female plants (hybrid) are crossed with wild male forms (130) or domesticated ones (93) or even with plants with a similar genotype to female genotype (Back Cross), thus obtaining F2 generation 100 Acta Botanica Malacitana 40. 2015 Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de La Plata) y cinco cultivares locales obtenidos durante trabajo de campo en el NOA (Lema, 2009a y b): zapallito, boliviano, tronquero, y dos provenientes de los Valles de Salta. En el caso de la segunda subespecie se cuenta con ejemplares cedidos por la investigadora L. Ashworth que corresponden a tres poblaciones obtenidas por polinización cruzada, autogama y libre en el centro de Argentina. 3) Restos arqueobotánicos. Material vegetal arqueológico que corresponde a semillas de C. maxima desecadas procedentes de sitios arqueológicos del NOA y del centro-sur de Perú. Entre los primeros se cuenta con ejemplares de los períodos Formativo o Temprano (ca. 2000-1200 AP; sitios: SSalLap 20, Pampa Grande y Los Viscos) y Tardío (ca. 1200-800 AP; sitios: Bebe de la Troya, Las Champas y Lorohuasi). Entre los segundos se cuenta con ejemplares de los sitios Bandurria, Cerro Lampay y Pampa de los Perros que corresponden al período Arcaico (ca. 3000-2000 AP). Para poder caracterizar morfométricamente la naturaleza del material se midieron con calibre digital el largo, ancho y espesor de cada semilla (N=1317; grupo 1 N=835; grupo 2 N= 349; grupo 3 N= 133). Se empleó análisis de Componentes Principales (CP), que estima ejes multivariados de mayor variación dentro de la muestra, sobre estas tres variables para conocer y dimensionar la variabilidad de los conjuntos analizados, identificando qué variable puede aportar mayor información al conocimiento de la variación entre las semillas y grupos estudiados. La variación total del conjunto de datos fue particionada en un componente de Figura 2. Media geométrica. A) Los genotipos silvestres y domesticados (A y B) incluyen colección de referencia más parentales de cruzamientos experimentales, los restos arqueobotánicos se ordenan temporalmente (E-G); B) semillas arqueológicas analizadas, de izquierda a derecha se ordenan los sitios de más tempranos a más tardíos. Geometric mean A) Wild and domesticated genotypes (A and B), reference collections and parents of experimental crosses included; archeobotanics remains arrenged chronologically (E-G); B) Analyzed archeological seeds, sources sites sorted from earliest to latest. A. B. Martínez et al. Domesticación en Cucurbita maxima 101 Source Type III S S Df Mean Square F-ratio p-value VAR_1$964.223 6 160.704 96.779 0 Error 1592.443 959 1.661 Tukey´s Honestly-Significant-Difference Test VAR_1$ (i) VAR_1$ (i) Difference p-value 95.0% Confidence Interval Lower Upper A-Silvestre B-domesticada -4.426 0 -5.096 -3.756 A-Silvestre C-F1 -2.012 0 2.465 -1.56 A-Silvestre D-F2 -2.571 0 -3.018 -2.125 A-Silvestre E-Arcaico -2.937 0 -4.428 -1.447 A-Silvestre F-Formativo -3.232 0 -4.36 -2.105 A-Silvestre G-Tardío -3.634 0 -4.172 -3.096 B-Domesticada C-F1 2.414 0 1.837 2.991 B-Domesticada D-F2 1.855 01.283 2.428 B-Domesticada E-Arcaico 1.489 0.064 -0.044 3.022 B-Domesticada F-Formativo 1.194 0.046 0.011 2.377 B-Domesticada G-Tardío 0.792 0.006 0.146 1.438 C-F1 D-F2 -0.559 0 -0.848 -0.27 C-F1 E-Arcaico -0.925 0.494 -2.377 0.526 C-F1 F-Formativo -1.22 0.014 -2.295 -0.145 C-F1 G-Tardío -1.622 0 -2.038 -1.205 D-F2 E-Arcaico -0.366 0.99 -1.816 1.083 D-F2 F-Formativo -0.661 0.536 -1.733 0.411 D-F2 G-Tardío -1.063 0 -1.473 -0.653 E-Arcaico F-Formativo -0.295 0.999 -2.076 1.486 E-Arcaico G-Tardío -0.697 0.809 -2.177 0.784 F-Formativo G-Tardío -0.402 0.939 -1.515 0.712 Analysis of Variance Figura 3: Analisis Estadístico Anova y Tukey. Statistic analysis.Anova and Tukey 102 Acta Botanica Malacitana 40. 2015 1995, Jungers et al. 1995). Debido a que el alto de las semillas no aportaba variación considerable dentro de la muestra, esta medida no fue utilizada en los análisis de forma (ver más abajo). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Tamaño La media geométrica del tamaño (fig.2 A), permitió diferenciar poblaciones silvestres y domesticadas. Las semillas pertenecientes a la generación F1 y F2 ocuparían un rango de variación intermedio entre las anteriores, principalmente F2. El material arqueobotánico de los períodos Arcaico y Formativo tiene un rango de distribución coincidente con F2 (híbridos), F1 y con la forma domesticada, en tanto el momento tardío coincide mayormente con la forma domesticada y en menor medida con F1 y F2. La presencia de hibridación y generación de complejos silvestre-cultivadodomesticado en C. maxima durante momentos formativos en el NOA ya había sido planteada por una de las autoras de este trabajo (Lema, 2009a). Con los análisis aquí presentados esta idea se reforzaría y se haría extensiva a momentos arcaicos y –de manera más acotada a algunos sitiosdurante el Tardío. Resultado que también se corrobora con el análisis estadístico que muestra claras semejanzas entre las formas arqueológicas y las formas actuales (fig. 3). El análisis de las semillas arqueológicas (fig. 2 B) indica una tendencia hacía el aumento de tamaño de las mismas a lo largo del tiempo, desde momentos arcaicos a tardíos. Esta tendencia, sin embargo, no es uniforme ya que en el caso del sitio tardío Las Champas, el tamaño de las semillas es notablemente menor al de los sitios precedentes y contemporáneos. Asimismo, parte de la variación del sitio tardío Bebe de la Troya coincide con lo registrado para momentos cronológicos previos. En este último sitio, análisis anatómicos en testas de estas Figura 4. Coeficiente de variación de la media geométrica. Se señalan los conjuntos de semillas arqueológicas de cronología diversa (A-C), cultivares de referencia con los valores menores (Inglés) y mayores (Valles de Salta) registrados dentro del conjunto analizado, todos los genotipos silvestres (G) y domesticados (D) (colección de referencia más parentales de cruzamientos experimentales) y F2 generados experimentalmente (H). Azul: Arcaico; Naranja: Domestiacado; Verde: Silvestre ; Marrón: Formativo; Rosa: CV. Ingles; Gris: F2; Rojo: Tardío; Violeta: CV. V Salta. Variation coefficient of the geometric mean. Archeological seeds from diverse chronology (A-C); reference cultivars with the lowest (Inglés) and highest values (Valles de Salta) among the analyzed group, all wild (G) and domesticated genotypes (D) (reference collection plus parents of experimental crosses) and generated F2 (H). Blue: Archaic; Orange: Domestiacad; Green: Silvestre; Brown: Formative; Pink: CV. English; Gray: F2; Red: Late; Violet: CV.V Salta tamaño y otro de forma. Se estimó el tamaño de cada semilla como la media geométrica (media aritmética de las variables originales en escala logarítmica; Jungers et al. 1995) del largo, ancho y espesor y la forma de las mismas mediante el índice largo/ancho (Corruccini, A. B. Martínez et al. Domesticación en Cucurbita maxima 103 semillas arqueológicas sugerían hibridación (Ratto et al. 2014). El conjunto de semillas de Lorohuasi es el que presenta mayor diferencia respecto a las restantes muestras arqueológicas, esto puede deberse a que el sitio corresponde a momentos de ocupación inkaica o posterior a la conquista española (Ratto et al. 2010). La mayor proporción de las semillas medidas muestra valores para el CV de la media geométrica entre 10 y 15 (fig. 4). Considerando este indicador, durante el Arcaico, la variabilidad de tamaños es mayor a la del resto de los genotipos, salvo lo registrado en formas domesticadas actuales (D), conjunto que exhibe gran variabilidad debido a que en la muestra se han incluido once cultivares. Hacía el período Formativo y Tardío esta variabilidad disminuye –con mínima variación entre ambosasemejándose al valor registrado en F2. Ninguno de los conjuntos arqueológicos posee variabilidad semejante a los cultivares actuales de referencia, tanto a los menos (cultivar comercial InglésD) como a los más variables (cultivar local Valles de Salta-D), por lo cual puede pensarse en la presencia de más de un cultivar en los conjuntos arqueológicos agrupados cronológicamente. Así y todo puede afirmarse que hubo una tendencia a la disminución de la variabilidad de tamaños a lo largo del tiempo. Forma Dado que el análisis de componentes principales no arrojó un resultado significativo para la variable alto, ésta no fue empleada para los análisis de forma. La varianza explicada para cada variable fue de: Largo 97%, Ancho 1,34% y el alto 0,72%. El índice largo/ancho no resultó útil para distinguir los distintos genotipos actuales entre sí. Pero sí, para diferenciar éstos de los conjuntos arqueológicos (fig. 5A). La figura 5B muestra Figura 5. Relación largo/ancho. A: se señala en todos los genotipos silvestres y domesticados (colección de referencia, más parentales de cruzamientos experimentales), F1, F2 y material arqueobotánico (E-G). B: conjuntos de semillas arqueológicas desde las más tempranas a la izquierda a las más tardías a la derecha. Lenght/width ratio. A: Wild and domesticated genotypes (reference collection plus parents of experimental crosses), F1, F2 and archeobotanic materials (E-G). B: From left to right, earliest and latest archeological seeds sites.