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El gen supresor del tumor de Wilms (Wt1) en el desarrollo neural y en la retina adulta Laura Ariza Medina Universidad de Málaga, Facultad de Ciencias, Dpto. Biologìa Animal El tumor de Wilms es una variedad de nefroblastoma causada por un fallo en la diferenciación de progenitores renales, y representa la segunda causa de cáncer abdominal más frecuente en niños. El gen supresor del tumor de Wilms (Wt1) es un regulador clave en el desarrollo del riñón y codifica para un factor de transcripción del tipo dedos de zinc C 2 H 2 , que se presenta en múltiples isoformas, aunque las principales se distinguen por la presencia o ausencia del exón 5 y del motivo KTS, entre los dedos de zinc 3 y 4. Las isoformas –KTS son reguladores transcripcionales, mientras que las +KTS intervienen en splicing e interacciones proteína-proteína. Mutaciones en el locus Wt1 están relacionadas también con los síndromes WAGR, Denys-Drash y Frasier, que incluyen defectos genitourinarios. La falta de función de Wt1 en ratones causa anomalías en el desarrollo de diferentes órganos, en concreto riñones, gónadas, corazón, bazo y retina. A pesar de que el gen Wt1 se expresa en el sistema nervioso central durante el desarrollo, son muy pocos los estudios que se han hecho acerca de su función en dicho sistema. Sólo se ha descrito, en mutantes sistémicos de Wt1, una menor supervivencia de las neuronas ganglionares de la retina, pero la letalidad temprana de este modelo impide ver si hay funciones en etapas posteriores y/o en adultos. Actualmente mi trabajo se centra en el análisis de la expresión de la proteína WT1 en ratones, concretamente en neuronas del sistema nervioso central durante el desarrollo, y en la retina tanto de embriones como de adultos. Para ello se emplearán ratones derivados del cruce de la línea transgénica Wt1 loxP cruzados con ratones Nestin CreERT2 , con los que induciremos la deleción condicional de Wt1 en progenitores neuronales y neuronas embrionarias. La utilización del driver Wt1 CreERT2 , nos permitirá silenciar Wt1 de forma condicional en ratones adultos mediante tratamiento con tamoxifeno, y ver los efectos de este silenciamiento en el sistema nervioso adulto. También se utilizarán ratones Wt1 Cre ;RosaYFP, en los que las células del linaje Wt1 expresan de manera constitutiva la proteína fluorescente YFP. En estos animales se han observado lo que parece corresponder a las células de Müller de la retina como células pertenecientes al linaje de Wt1 (estamos a la espera de confirmar estos resultados). Por último contamos con ratones Wt1 GFP/+ que informan de la expresión de Wt1 en tiempo real a través de la proteína verde fluorescente GFP. Mediante todos estos modelos trazaremos no sólo la expresión real de Wt1 en el sistema nervioso central y retina sino también el destino del linaje celular que expresa este factor durante el desarrollo y las consecuencias de su falta de función.
