Estudio farmacodinámico del lúpulo. (Humulus Lupulus L.). – II. Acción estrógena

ARS PHARMACE UTICA REVIS'l'A DE LA FACULTAD DE FARMACIA UNIVERSIDAD DE GRANADA Tomo XII -Núm. 11-12 No iemb e-Diciemb e, 1971 Di ec o , PROF. DR. JESUS CABO TORRF:S Subdi ec o : PROF. DR. JOSE M.· SuÑ ARBUSSA Je e de Redoccl6n: PROF. Adj. DR. JUAN OLIVER VERD Redaccl6n y Admlnls acl6n: FACULTAD DE FARMACIA. GRANADA-EsPARA Imp ime: G á icas del Su . S. A.- -Boque ón. 27-G anada 1972 1.000,¡empla es Dep. Legal GR. núm. 17-1960 �uma. i" PAG. THABA.JOS ORIGINALES DE LA FACULTAD Es udio a macodinámico del lúpulo. (Humulus Lupulus L.).-IL Acción es ógena, po L. B a o, J. Cabo, A_ F aile, J. Jiménez yA. Villa ... 421 Es udio compa a i o de di e sos ipos dl esencias de espliego e. pañol as, po M. Ma ín Mesone o y J. Cabo To es ... 427 E idencia elec o o é ica de la o mación de compues os de asociación en e osas y w-aminoácidos, po F. Sánchez-Medina y F. Mayo 437 Es udio a maco écnico de los es e es g asos de polie ilenglicoles. 4. Mezclas cua e na ias aselina-emulgen e-alcohol ce ílico-glice ina e "hid ophilic ioa men", U.S.P. XV, po A. Pa e a y J. M.' Suñé 445 Técnica de desin ección de semillas pa a su cul i o a¡;ép ico, con is as a la inoculación bac e iana especí ica, po J. M.a Ba ea, M. Eoco ihuela y V. Callao THABAJOS DE COLABORACION Ensayo de la lucha con a el " epilo" del oli o en G anada. U. Pe sis encia 459 de algunos ungicidas, po P. Ramos, E. Es eban y V. Callao ... 471 Ensayo de la lucha con a el " epilo" del oli o en la p o incia de G ana- da. TU, po P. Ramos Cla e o 479 ECOS DE FACULTAD Bodas de Pla a de la p omoción de 1947 de la Fanll ad de G anada 487 TRABAJOS ORIGINALES DE LA FACULTAD DEPARTAMENTO DE FARMACOGNOSIA y FARMACODINAMIA P o . D . J. CABO TORRES :STUDIO F ARMACODINAMICO DEL LUPULO. (Humulus Lupulus L.) I1.-ACCION ESTROGENA L. BRAVO, J. CABO, A. FRAILE, J. JIMENEZ. A. VILLAR (*) Son ecuen es las al e aciones del ciclo mens ual en las muje es empleadas en la ecolección del lúpulo, de o ma que la mens uación suele apa ece a los dos días del comienzo de la ecolección, indepen ,'ien 2men e de la ase del ciclo en que se encuen en en dicho momen o. Ls e enómeno hace sospecha la exis encia de sus ancias de ac i idad es ogénica en el lúpulo. En e ec o, KOCH y HEIM (1) encuen an alo es ue oscilan en e 20.000 y 300.000 U. 1. de ac i idad es ogénica po g a ¡ ,10 de in lo escencia. Es as sus ancias es a ían con enidas ambién en la ce eza (elabo ada con lúpulo) si bien en can idad muy in e io , pues son des uídas l n g an pa e du an e la e men ación. No obs an e, se es ima que el con enido en sus ancias es ogénicas de la ce eza oscila en e 1 a 35 'Y . o li o (de 10 a 360 U.l.), can idad no desp eciable si se conside a que 11 eliminación dia ia de enoles e oides en la muje sexualmen e ac i a es del o den de 20 a 25 'Y- Los ci ados au o es no excluyen la posibilidad de que las al e acio- es gene ales (obesidad, es e ilidad, degene aciones hepá icas, e c.), que se obse an en los g andes bebedo es de ce eza, que consumen habi ualmen e can idades dia ias de has a 10 li os, pueda se debida, ade ¡ lás de la in oxicación alcohólica, a la in oxicación es ogénica. Desde el pun o de is a e apéu ico, es os au o es señalan el posible c'01pleo de la ce eza en aquellos casos en que es á indicada la admi ¡ is ación p olongada de es ógeno s a dosis débiles, como en la pe u  bación del clima e io, hipe sexualidad de la especie masculina, e c. Dada la acilidad con que los es ógeno s son abso bidos po ía cu l1nea, es os au o es p econiza on además, el empleo de ex ac os de lúnula pa a baños, en los casos �n que es á indicada una e apia es ógena. --- *) Los au o es igu an po o den al abé ico. 422 L. BRAVO, J. CABO, A. FRAILE, J. JIMENEZ. A. VILLAR TECNICA Exis en mé odos químicos y ísicos de g an especi icidad pa a la de e minación de los di e en es es ógenos, si bien su aplicación a las mez_ clas complejas (o ina, po ejemplo) equie e labo iosas ope aciones pa é:. el accionamien o de los ex ac os. El mé odo biológico más clásico es el del o is aginal de la a a o iginalmen e p opues o po ALLEN y Do sy (2). La écnica ha sido mo' di icada, en sus de alles, po los di e en es au o es. Así, algunos emplean como animal de expe imen ación el a ón; o os abajan con a as in madu as en luga de a as o a iec omizadas; ambién exis en di e sa': écnicas en las que la adminis ación del p oduc o no se hace po ía subcu ánea, sino po aplicación in a aginal; y, en in, el a amien o ma emá ico de los da os ob enidos en el ensayo, pa a halla el esul ado inal, ambién ha sido ampliamen e deba ido. O os c i e ios de ac i idad que ambién pueden oma se en cuen a pa a la alo ación de los es ógenos son: el aumen o de peso del ú e o en a as o a iec omizadas o inmadu as; la ape u a de la agina en cobayas, a as o a ones inmadu os; el desa ollo del o iduc o en pollos de cua o días de edad, e c. A con inuación desc ibimos el mé odo del o is aginal de la a a o de Allen-Doisy (2): Pa a lle a a cabo la alo ación son necesa ias 40 a as, hemb as o a iec omizadas un mes an es del ensayo, y en las que se ha comp o b�do la e icacia de los es ógenos pa a p oduci el es o. Es ecomendable segui la ma cha que se expone a con inuación: Se seleccionan 50 a as hemb as, de un peso comp endido en e 80 Y 100 g. y se les ex i pan los· o a ios. En e los diez y los quince días si guien es a la ope ación se es udian los exudados aginales de cada uno de es os animales en o is que se p epa an cada d�a, y se comp ueba que en ninguno de ellos apa ece es o; en caso con a io, se eliminan los animales que lo p esen en. A cada uno de los es an es se les in yec an subcu áneamen e 2 ILg de es ona disuel os en 0,2 mI de acei e y se p epa an o is aginales a las 24, 48, 72 y 96 ho as de la inyección. Las a as que no p esen an es o bien de inido en alguna de las obs�  aciones ealizadas debe án elimina se. En e las es an es se selecclO- nan 40, cuyo peso co po al sea ap oximadamen e igual, y con ellas se ealiza la alo ación, no an es de 10-15 días después de e ec uada 18 p ueba an e io . Las a as se dis ibuyen en dos lo es de 20 animales cada uno, de al mane a que es én epa idas Do igual en ambos g upos a en,di en � a sus pesos. Los animales de uno de los lo es eciben, po inyeccion sU cu ánea en el do so, una dosis. igual pa a odos e independien e de sU peso, del pa ón in e nacional. Dicha dosis debe se an eada p e iamen e pa a que cause ap oximadamen e un 50 po cien o de eacciones p� si i as en los animales. También se ha ·de ene en cuen a que la dosJs en cues ión debe á es a con enida en 0,2 mI de acei e (si el p oduc o .8- O n 1- alo a es oleoso). Gene almen e se ob iene es e esul ado con 5-l 11 ARS PHARMACEUTICA 423 dades de es ona, es deci , que la solución del "s anda d" debe á ene unos 5 'Y po milili o. Las o as 20 a as eciben el p epa ado p oblema. La dosis po ani mal ambién se á elegida po an eo p e io pa a que co esponda ap o ximadamen e a la ac i idad del "s anda d". Se p epa an o is aginales de cada uno de los 40 animales a las J4 48, 72, 84 Y 96 ho as de la inyección, omando no a de las a as que p esen an es o ípico en alguna de las obse aciones. A los 15 días de la p ueba an e io se epi e el ensayo, pe o inyec ando aho a el p oblema a los animales que habían ecibido an es el ·'s anda d", y ice e sa (ensayo c uzado). Gúpulo empleado Hemos abajado con dos lúpulos p oceden es de dis in a cosecha de dis in a p o incia, uno de León y o o de Galicia, pe o pa a hace más co a nues a exposición nos limi a emos a menciona el lúpulo, sin especi ica a cual de ellos nos e e imQs, en endiéndose que odas las p uebas han sido ealizadas con ambos. El lúpulo, una ez ecogido de la áb ica de ce eza, lo hemos man enido he mé icamen e ce ado y a una empe a u a de 0° ap oximada men e. Animales Los animales empleados ue on a as de aza "Nes le", de un peso ap oximado de 100 g amos. A cada animal del lo e ipo le inyec amos 7 unidades de es ona po 100 g amos de peso. Los o is aginales los ijamos en alcohol me ílico du an e unos cinco minu os, se secan al ai e y :os e io men e los eñimos con azul de me ileno. Ex ac os Los ex ac os ealizados, an o pa a el lúpulo de Galicia como pa a el de León, así como pa a el de dis in a cosecha, ue on los siguien es: Suspensión d'e lúpulo en pol o/H20 a.l 10%. Adminis amos 2 mI a cada animal, po ía o al. Mace ación con agua al 5%.-A 5 de lúpulo p e iamen e amizado po el amiz núm. 50, se añaden 50 ml de agua des ilada y a la empe a u a ambien e. En es as condiciones, se man ienen en mace ación du an e seis d as, agi ando de ez en cuando, al cabo de los cuales il a nos con exp esión y ecogemos el il ado en asija a ada, al que .aña dimos agua des ilada has a comple a los 50 mI. Al ma co le añadimos o os 50 mI de agua, agi ando de ez en cuando. Se il a con exp esión añadiendo can idad su icien e de agua des ilada pa a comple a los 50 nl. Se eunen los il ados. 424 L. BRAVO, J. CABO, A. FRAIL.E, J. JIMENEZ. A. VILLAR De es e ex ac o ecogido, adminis amos, po ía o al 2 mI a cada animal del lo e p oblema. Mace ación C'on é e aL 5%.-A 1 g amo de lúpulo, p e iamen e a mizado po el amiz núm. 50, añadimos 10 mI de é e , man eniéndolo en mace ación du an e seis días, agi ando de ez en cuando. Fil amos ca exp esión, y al ma co le añadimos o os 10 mI de é e . Al cabo de cua o días, lo il amos. Reunidos los il ados, des ilamos en baño ma ía a 43°, y al esiduo ob enido le adicionamos 3 mI de acei e, p e iamenj, neu alizado. A cada animal del lo e p oblema le inyec amos 0,2 mI. MCLC'e ación COn é e ' aL lO%.-Igual al an e io , pe o con la única excepción de que la can idad de lúpulo empleado ue doble; es deci, 2 g amos. Soxhle con é e .-Las pesadas die on los siguien es esul ados: Ma az acío ." 24,6770 g amos Ca ucho aCÍo", 0,9584 " Ca ucho con lúpulo 2,4451 " Lúpulo 1,4867 " La can idad de é e ue de 15 mI, el iempo de ex acción de sie e ho as y la empe a u a de 43°, El ex ac o ecogido lo lle amos a baño ma ía a la misma empe e. u a que lo habíamos ex aído, y una ez des ilado el disol en e, le aña dimos 3 mI de acei e neu alizado. De es a solución, inyec amos 0,2 mI a cada animal. Es e ensayo lo epe imos en las mismas condiciones, pe o la can idau de lúpulo ue supe io : 2,8325 g amos, pe maneciendo cons an e la de é e . Una ez des ilado, le añadimos 3 mI de acei e e inyec é!mos 0,2 11"' a cada animal. Mace ación con alcohol de 30° al 10%.-La écnica seguida, así como las can idades empleadas, ue on exac amen e iguales a las ya eseJié1 das en la mace ación con agua al 10%. La dosis adminis ada a cada animal del lo e p oblema ue de 2 mI po ía o al. Mace ación COn alcohol de 60° all0%.-Exac amen e igual al an e io Mace ación con alcohol de 70° all0%.-Exac amen e igual al an e io", Mace ación con alcohol de 96° all0%.-Exac amen e igual al an e io. Hemos de hace cons a que las a as sopo a on bien los 2 mI de alcohol de 96°, sin que se no a an sín omas de in oxicación alcohólic< RESULTADOS EXPERIMENTALES Todos los esul ados ob enidos con los di e sos ex ac os ue on ne ga i os. Sus causas las desconocemos, aunque, como ya indicamos a n � io men e, pueden se debidas o bien a que el lúpulo no e a esca . . ARS PHARMACEUTICA 425 además había su ido una se ie de manipulaciones indus iales, o a que el disol en e empleado no uese idóneo. En lo que se e ie e a los esul ados ob enidos en el lo e ipo, he mos de indica que ue on óp imos, es deci , que ap oximadamen e al 50 po cien o le p o ocamos el es o. CONCLU�IONES l.-T abajando con la écnica de Allen-Doisy, con enien emen e pues a a pun o y sensible a es ógenos di e sos, no hemos conseguido en absolu o ap ecia acción es ogénica en lúpulo seco de p ocedencia española, ni con suspensión en pol o de d oga ín eg a ni con ex ac os di e sos en agua, é e y alcohólica de g aduaciones dis in as, con un o al de nue e ipos de ex ac os más la suspensión de la d oga. 2.-Que las mues as de lúpulo es udiadas, en e a lo es ablecido pa a lúpulos de o o o igen po nume osos au o es, no poseen acción es ógena sob e a a o a iec omizada. Es a so p enden e nega i a que, sin emba go, demos amos cla amen e, en e a las a i maciones de nu me osos au o es, nos sugie e una' hipó esis, pendien e de comp obación, que concilia ía la con o e sia espec o a la acción es ógena del lúpulo, en el sen ido de que és a esidiese en un componen e meno iso ia ónico demos ado en la d oga (isoque ci ósido), cuya p esencia podía a ia de unas sue es a o as con el o igen geog á ico o con su p oceso de desecación, como se ha demos ado en o as especies ege ales. BIBLIOGRAFIA l.-KOCH, W. y HEIM, G.-Münch. medo Woch., 95, 845, 1953. 2.-ALLEN, E. Y DOISY, E. A.-J. Am. medo Ass., 81, 819, 1923