Flavonoides presentes en extractos hexánicos de especies del género Sideritis

FLAVONOIDES PRESENTES EN EXTRACTOS HEXANICOS DE ESPECIES DEL GENERO SIDERITIS A. Villa , E. Ca e e o, O. Palomino Dp o. Fa maCOlogía. Facul ad de Fa macia. UCM. España SUHMARY.- In con inua ion o he s udies o he Genus Side i is ha his Pha macology Depa men has done, we ha e isola ed and iden i ica ed he la onoid compounds in he hexanic ex ac s o en species o his Genus by an HPLC me hod. We ha e o ema k he p esence o Isoscu ella ein-7-0-(allosyl-glucoside), in all he s udied ex ac s. KEY-WORDS: la onoides, ex ac o hexánico, Side i is RESUMEN.- Con inuando con los abajos lle ados a cabo en el Dep. de Fa macología, sob e el géne o Side i is, hemos sepa ado e iden i icado los la onoides p esen es en los ex ac os hexánicos co espondien es a 10 especies de dicho géne o, po écnicas de HPLC y con ayuda de pa ones. En e los compues os aislados, cabe des aca la isoscu ela eina 7-0-(alosil-gluc6sido), p esen e en odos los ex ac os. PALABRAS CLAVE: la onoids, hexanic ex ac , Side i is INTRODUCCION Dis in as especies del géne o Side i �s, son u ilizadas en medicina popula en el á ea medi e ánea española, pa a as o nos diges i os, como an iin lama o ios sin lesiona la mucosa gás ica. En el Depa amen o de Fa macologia, se iene abajando desde hace años sob e es e géne o, in en ando aisla e iden i ica los p incipios ac i os esponsables de su ac i idad a macológica; eú abajos an e io es se han iden i icado compues os de na u aleza e penoide como el bo ja iol y la onoides como la hypolae ina-8-0-�-D-gluc6sido, con ac i idad an�iin lama o ia. �n es e abajo, in en amos aisla , pu i ica e iden i ica , los la onoides p esen es en los ex ac os hexánicos de diez especies del géne o Side i is, den o de una in es igación más amplia que incluye el es udio de odos los compues os la ónicos p esen es en cada una de las especies, con el obje o de encon a una elación en e su con enido an o cuali, como cuan i a i o y su ac i idad an iin lama o ia, así como encon a p oduc os que pueuan se ellos mismos o con lige as modi icaciones, u ilizados en �a e apéu ica an iin lama o ia. 473 MATERIAL Y HETODOS Hemos ecolec ado diez especies de Side i is, que se elacionan a con inuación así como su localización y la echa de la ecolección. Un ejempla de cada una de ellas, se ha deposi ado en el he ba io de la Facul ad de Fa macia (MAF). -Side i is oe ens Clem. ex. Lag. ; Sie a Gádo (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is lu eola F. Q. ; Puen e Na a o (Alme ia); Mayo, 1990. -Side i is alme iensis Pau. ; Los Neg os (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is hi su a L. ; Baca es (Alme ia), Julio, 1990. -Side i is leucan ha a o se a i olia Ca .; Sie a Gádo (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is bi lo a Po a e Rigo. ; Lupineda de las To es (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is leuean ha subsp. ineana a .me idionalis.; Véda (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is bou geana Boiss. & Reu . ; Mon ealeg e-Fuen eálamo (Albace e), Julio, 1988. -Side i is pusilla subsp. alme iensis.; Sie a Gádo (Alme ia), Mayo, 1990. -Side i is ibanyezii Pau. ; Sie a del Vien o (Mu cia), Mayo, 1990. CCF: Fase es aciona ia: C oma o olios Silica Gel 60 F254 (5554) Me ck Fases mó iles: -Benceno:Me anol: Ac. acé ico (45: 3: 2), (geninas) -Ace a o e ilo: Ac. ó mico:Ac. acé ico glacial: agua (100:11: 11: 27), (he e ósidos) Re elado : Obse ación a la luz UV. NP/PEG NP: 1% di enilbo iloxie ilamina en me anol (és e �-e ilamino del ác. di enilbó ico). Toma 10 ml. PEG: 5% polie ilenglicol-4000 en e anol. Toma 3 ml. 474 HPLC: C oma óg a o: Va ian modula equipado con bombas Va ian mod. 2510. De ec o UV de longi ud de onda a iable, Va ian modo 2550. P ocesado de da os Va ian DS 654. Imp eso a Hewle Packa d. Fase es aciona ia: Columna Cl8 hype sil 5�m, 200 x 4.6 mm. Fase mó il: -Agua:Ac. acé ico-Ace oni ilo Todas las especies se deseca on a empe a u a ambien e, p ocediéndose después a su pul e ización y pos e io ex acción po pe colación en io. Se comenzó con un disol en e apola , hexano¡ una ez ago ada la d oga, el ma co se some e a nue as ex acciones. En p ime luga se empleó una mezcla e anol:agua (70:30), ambién en pe colado . El ex ac o hid oalcohólico se concen ó en un o a apo a p e�ión educida has a eliminación de odo el e anol. El ex ac o acuoso esul an e, se ol ió a ex ae en ampolla de decan ación con disol en es o gánicos de pola idad c ecien e. Así se ob u ie on o os cua o ex ac os: e é eo, ace a o de e ilo, bu anol y el úl imo, el es an e ex ac o acuoso ya ago ado, que se dejan pa a es udios pos e io es. Todos los ex ac os se concen a on a sequedad en o a apo a p esión educida. Los ex ac os hexánicos de las diez especies se some ie on a un análisis po c oma og a ía en capa ina. Se u iliza on c oma o olios de silica gel con indicado de luo escencia y una ase mó il de desa ollo de geninas y o a de he e ósidos. Una ez desa olladas las placas, se obse a on a la luz UV, an o an es como después de some e las a apo es de amoniaco. Pos e io men e se e ela on con NP/PEG. Pos e io men e los 10 ex ac os hexánicos se some ie on a análisis po HPLC en ase e e sa, en las condiciones siguien es: Se u ilizó una columna Cl8 hype sil de 5�m de amaño de pa ícula y de 200 x 4.6 mm. -La ase mó il empleada ué: agua/ác. acé ico (2%) :ace oni ilo, con g adien e lineal du an e los 10 p ime os minu os. 475 Bomba A: agua/ác. acé ico (2%) Bomba B: ace oni ilo ,¡: 70% de A¡ ·· : 20% de A ¡o: 50% de A a de análisis : 20 mino lujo: lml/min. A.: 254 nm. RESULTADOS Se ha comp obado la p esencia de la onoides en odos los ex ac os hexánicos, an o en o ma de geninas lib es, más abundan es, como algunos he e ósidos. A modo de ejemplo se incluye en la igu a 1, el c oma og ama pe enecien e aS. leucan ha subsp. incana a o me idionalis. '" e ... ... o e .. ... .. .. " .. ..:1 .. ... .. .. " . u . ' o • • ... ... o ... .. .. o ., ... .. u ... o .. e Q ... ... e ... ... ., e .. i ... '" U .. ... '" I!I }' ,Jl l"' , L�-� :_·:�� - '::_- C cma og ama ex ac o hexánico Side i is l.eucan ha subsp. iDeaDa aJ:. .e idional.is Fig. 1 Con la ayuda de los pa ones más ecuen es en el géne o Side i is, se han iden i icado po HPLC, los siguien es compues os: 476 .j:>. ....,¡ ....,¡ PLAVOHOIDES EN LOS EXTRACTOS BEXAHICOS C is. Sido hn . Ga d. Ci s. Side i is oe ens ++ ---- Side i is lu eola + --+ - Side i is alme iensis + --+ - Side i is hi su a ---+. - Side i is leucan ha a o se a i olia + -- ++ ++ Side i is.bi lo a ---++ - S. leucan ha subsp. incana a o me idionalis + --++ + Side i is bou geana ----- Side i is �usilla subsp. alme iensis + -� -++ Side i is ibanyezii ----- C is.: C isoe iol, Sid.: Side i o la ona.¡ hn .: Xan omic ol¡ Ga d.: Ga denina D¡ Ci s.: 8-0Me-Ci silineol Lu .: Lu eolina¡ Isosc.: Isoscu ela eina 1-0-alosilqluc6sido. Lu . Isosc. +++ +,++ ++ ++ ++ ++ + ++ + ++ ++ ++ ++ ++ + + ++ +++ -++ DISCUSION DE RESULTADOS Todos los ex ac os hexánicos, con ienen la onoides en mayo o meno p opo ción. La isoscu ela eina 7-Q-alosil-glucósido, se encuen a como la onoide p incipal en odas las especies es udiadas. De dichas especies, únicamen e una no con iene lu eolina, la ona e ahid oxilada, como es bien conocido, muy abundan e en la na u aleza; su p esencia en los ex ac os hexánicos pod ía debe se a que se encuen a en un po cen aj e muy al o en las plan as y la ex acción has a ago amien o con hexano, puede a as a pequeñas can idades de dicha la ona. Sin emba go no se ha de ec ado en ningún ex ac o la p esencia de apigenina, ambién abundan e en es as especies. El c isoe iol y la ga denina D, la onas me oxiladas, se encuen an en los ex ac os hexánicos co espondien es a 6 de las especies es udiadas, lo que concue da con la bibliog a ía consul ada. Se des aca la ausencia de dos la onas polime oxiladas, side i o la ona y xan omic ol, que no se han de ec ado en ningún caso y que son ecuen es' en el géne o Side i is. BIBLIOGRAFIA Ba be an, F.A.T.; Tomás, F.; Fe e es, F. "Two :'a one glycosides om Side i is leucan ha". Phy ochemis y 23, 2112- 2113 (1984) . .:. Ba be án, F.A.T.; Núñez, J.M.; Tomás, F. "An HPLC s udy o la ones om so ne Spanish Side i is species". Phy ochemis y 24, 1285-1288 (1985). -Ba be án, F.A.T.; Tomas, F.; Fe e es, F. "Isoscu ella ein-7-0- (allosyl (1 ... 2) glucoside) om Side i is leucan ha". J. Na . P od. 48, 28-32 (1935). -Ba be án, F.A.T.; Tomás, F. "An allose con aining 8-hid oxy ch ysoe iol diglycoside om Side i is leucan ha". Re . La inoame . Quím. 16, 47-50 (1985). -Rod iguez, B. "S, 4'-dihyd oxy-6, 7, 8, 3'- e ame hoxy la one om Side i is mug onens;'s". Phy ochemis y 16, 800-801 (1977). Rod igClez, B.; Ma �ín Panizo, F. "Fla onas de Side i is se a a". 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