Microflora aerobia lítica en suelos; su distribución, número y acción lítica

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA. FACULTAD DE FARMACIA UN IVERSIDAD DE BARCELONA MICROFLORA AEROBIA LITICA EN SUELOS; SU DISTRIBUCION, NUMERO y ACCION LITICA F. CONGREGADO, M.a DOLORES SIMON y A. RAMOS-CORMENZANA * RESUMEN Se aislan sob e E. coli 312 mic oo anismos li icos (101 Ac inomice os, 108 Myxobac e ias y 103 Eubac e ias). Es udiándose la ac i idad li ica sob e o os mic oo gaI).ismos an o G am posi i os CB. ce eus, s o au eus y M. lu eus) como G am nega i os (K. pneumoniae, E. ae ogenes, P. mi abilis, S. yphimu ium, B. ca a ha lis, S. mace an6, PS. ae uginosa y Az. ch oococum) y una le adu a (C. albicans). Se obse a una mayo ac i idad li ica pa a los ac inomice bs, las eubac e ias son más ac i as que las myxobac e ias espec o a mic oo ga nismos G am nega i os, y ice e sa pa a los G am posi i os. No se ha encon ado elación alguna en e ipo de suelo y dis ibu cIón de especies. SUMMARY Th ee hound ed and wel e ly ic soU mic oo ganisms (101 ac inocy ces, 108 myxobac e ia and 103 eubac e ia) we e isola ed on E. coli cells. The ly ic ac i i y on o he mic oo ganisms, was' al so s udied (The bac e ia used we e G am posi i e (B. ce eu S, s o au eus y M. lu eus) and G am nega i e (K. pneumoniae, E. ae ogenes, P. mi abilis, S. yphimu ium, B. ca a hali'3, S. mace ans, PS. ae uginosa y Az. ch oococum) and a yeas (Candida albicans). The g ea es ly ic ac l i y was obse ed o he ac inomyces isola ed. The eubac e ia we e mo e ac i e han he myxobac e ia on he G am nega i e o ganisms and he " ice e sa" o he G am posi i e. No ela ion was obse ed be ween ne ype o soil and he dis ibu ion o he isola ed species. * Ac ualmen e Depa amen o de Mic obiologia Facul ad de Fa macia. Uni e sidad de G anada. A s Pha macéu ica. Tomo XVIII. Núm. 1. 1977. 114 ARS PHARMACEUTICA RÉSUMÉ On déc i l'isola ion d'ac inomyce es ly iques des soIs de Ba celona, de meme que l'e ude a son spec e d'ac i i é ly ique. Des 101 souches isolées, 98% son S ep omyces spp. e 2% son Spi Ollospo a spp. On a dé e miné le spec e d'ac i i é ly ique des ac inomyce es isolés p ou an sa capaci é ly ique su une sé ie de bac é ies ype G am posi i es e G an néga i es. On obse e que les ac inomycees isolés possédaien plus g ande capa ci é ly ique su les bacilles G am néga i s non pigmen és. INTRODUCCI ON La capacidad de elabo a enzimas que p oducen la lisis mic o biana ha sido desc i a en nume osos abajos, KAMATe al. (1 ); CA LLAO e al. (2); R cHMoND (3); SALTON (4), en los que p esen an di e sos ipos de mic oo ganismos ales como Myxobac e ias, Eubac e ias, Ac inomice os y Hongos. Sin emba go, el es udio de es os o ganismos como un g upo i siológico, den o de la mic o io a del suelo, no ha sído conside ado. Se ppe ende en es ,e es udio in es iga la mic o io a ae obia lí ica en suelos de Ba celona (España), su dis íbución y la ampli ud de su acción lí ica. MA TERIA L Y METODOS Suelos Las mues as de suelos conside adas ue on omadas de di e sos pun os de Ba celona, conside ada como egión climá ica medi e á nea, con una empe a u a mediana anual de 16 -18, 5°C, según la i ud. Las ca ac e ís icas de los mismos apa ecen en la abla 1. Med�os de a,isla,miJen o y oonse ación El medio u ilizado pa a el aislamien o de los mic oo ganismos lí icos ue el de KAMATe al. (1). La conse ación de las cepas aisladas se lle ó a cabo man e niéndolas en ne e a a 4°C, semb adas en ubos de aga -células de Esche ichia coli inclinados DHALA (5). ARS PHARMACEUTICA 115 TABLA 1 RECUENTO DE MICROORGANISMOS LITICOS EN LOS SUELOS ESTUDIADOS Mues a N.O mic ./g. n.o Tipo de suelo pH suelo seco 1 Alu ial 7,3 160.000 2 Alu ial 7,3 146.000 3 Alu ial 7,4 46.000 4 Tie a pa da me idional 6,9 163.000 5 Tie a pa da me idional 6,7 49.000 6 Tie a pa da poco desa ollada 6,7 116.000 7 Alu ial 7,2 82.000 8 Tie a pa da caliza 7,6 33.000 9 Tie a pa da caliza 7,3 41.600 10 Tie a pa da caliza 7,4 86.000 11 Tie a pa da caliza 7,5 49.300 12 Tie a pa da sob e a enisca 7,2 190.000 13 Tie a pa da sob e a enisca 7,5 43.000 14 Tie a pa da sob e a enisca 6,5 133.000 15 Alu ial 7,1 123.000 16 Alu ial 7,3 30.300 17 Alu ial 7,6 52.600 18 Alu ial 7,2 111.300 19 Tie a pa da me idional 6,7 203.000 20 Tie a pa da caliza 7,2 28.300 21 Ranke 7,5 2.400 22 Tie a pa da eu ó ica 5,6 46.600 23 Alu ial 7,2 52.000 24 Alu iones silíceos 7,4 21.000 25 Alu ial 7,6 120.000 26 Alu ial 7,4 360.000 27 Alu ial 7,7 90.000 28 Alu ial 7,3 143.000 - - TABLA ]J (j) LISIS DE BACTERIAS 1 LEV: DURAS POR � lCROORGANIS�IOS DEL SUELO G RAl-! NEGATIVOS GRMI Ul l/O l'IGl-IENTADOS PIGMENTADOS NO ;:¡ ::> '" BACILOS I COCOS I BACILOS IBACHOsl COCOS < > úl .... APSULADOS I NO CAPSULADOS 00 ¡. � e " i . '" ( ) "' " U "' .: � .¡.) " " 3 .-i .� :Ji o " " � U � .-i � U e V! .-i 'M .-i .-i e !/) .¡.) o !/) () oi .� " () 'n .� ,...; ¡. " " " " o o <) " "' " � () (/} el (/} :.- e .o o � ,...; " 11 E -;: .� () e e " () � ( ) o " o � "d e Pl 'M O o O () 'M e " " < ) O .,., .o O .-< � ,...; ¡. () " 'M " Ul "' § ¡. ¡. .¡.) � O >, -§ " '" " "d JJ O () .-< " >, � O .¡.) " () .o " " O " e -" > " ¡. () � � ." O ''-; ¡. Ci. � " � e 'M " " .¡.) " " " .-< "- el " " ¡. " ¡. o " () " <) .-< el .o ' J .-< e e "-'M :ü ' . .-1 " " " " < ) " N -¡¡ " " " 'M U .-< I: '" "-'" e <Il .¡.) "' <) <Il E "-" « '" .¡.) :<: " :.- Pl a= :.- (') 76 157 88 166 116 56 72 91 90 59 69 Ss ".I c:: 24,45 50,32 28,20 53,20 37,17 17,98 23,07 29,16 28,83 18,91 22,11 27,2-l >'1 .... (') :.- 33 I 80 51 65 47 33 37 60 36 25 27 38 43,4'2 50,95 57,95 39,15 40,51 58,92 51,38 65,93 40,00 42,37 30, q -l4,70 23 I 36 14 57 28 5 10 10 25 1 S " 122 -.' 30,26 22,92 15,90 34,39 24,14 8,92 13,88 10,98 31,11 30,50 33,33 25,88 20 41 " 4-1 13 35 I 18 I 25 21 26 16 -J 19 I 2" 26,31 26,13 26,15 26,50 23,14 34,74- 23,09 2S,�9 27, L 1 27,2-l 29, � 2 ARS PHARMACEUTICA 117 AISLAMIENTO E IDENTIFICACION Con las mues as medias amizadas' se p epa a on suspensiones diluciones en pi o os a o sódico al 1 po mil desde 10-1 a 10-6 sem b ando de cada una de las diluciones 0,1 mI, sob e la supe icie de las placas de aga -células de E. C'oli. Medio p epa ado según KAMAT e al (1). Despu€s de la inoculación s,e íncuba a 28°C du an e dos sema nas, p ac icándose obse aciones pe iódicas cada dos días. Las colonias do adas de capacidad lí ica apa ece án odeada de un halo de lisis o zona de acla amien o anspa en e. Cada colonia lí ica aislada se esiemb a sucesi as eces en placa de aga -células de E. c!oli, comp obándose así el aislamien o de una cepa lí ica pu a. ENUMERACION En cada caso se p ocedió a la enume ación de mic oo ganismos lí icos de acue do con el núme o de colonias encon adas en las pla cas u ilizadas pa a el aislamien o. EXPERIENCIAS DE LISIS SOBRE OTROS MICROORGA NISMOS Pa a conoce la ampli ud de la acción lí ica de las cepas aisladas se u iliza on bac e ias conocidas an o G am posi i as como G am nega i as, y una le adu a ( abla II). La écnica seguida pa a es e es udio ue undamen almen e si mila a la de aislamien o, sus i uyendo -la suspensión -de _ E'. c:Ql� .po : la de cada uno de los mic oo ganismos ipo ecogidos. Sob e las placas así p 'epa adas, se inocula on cada una de las cepas aisladas, ano ando su capacidad pa a p oduci lisis. RESULTADOS El núme o de mic oo ganismos lí icos exis en es en los dis in os ipos de suelo empleados en es e abajo se exp esa en la abia I. Es os mic oo ganismos, de acue do con su clasi icación (C ON GREGADO (6), co espondían: 101 cepas a los Ac inomice os,· géne os S <ep omyee's y Spi ,iLLospol "a,; 108 cepas myxobac e ias géne os My xyooc'(:ws, Cy ophaga, Cho<nd lOclOccus, Chond omyces y .Polyangium ; 118 ARS PHARMACEUTIC:A 103 cepas, e an eubac e ias pe enecien es a los g.éne os Bacil1us, Ps-eudomonas y Ach omobac .e . Los esul ados de la ac uación lí ica de las cepas aisladas se ex ponen en la abla n. DISCUSION Como en el mé odo u ilizado pa a el aislamien o y ecuen o de mic oo ganismos lí icos se empleó una cepa de E. coli, es posible que hayamos soslayado el aislami-en o de algunos mic oo ganismos lí icos que no u ie on la capacidad de a aca la bac e ia empleada en el medio de aislamien o, aunque sí ue an lí icos s.ob e o as cepas bac e ianas. El análisis de los esul ados ob enidos en el aislamien o y enu me aCÍ-ón de mic oo ganismos lí icos, en las 28 mues as de suelo obje o de es udi.o, se .obse a que en odos los casos se aisla on mi c oo ganismos capaces de lisa la cepa de El. co-li empleada. Es e núme o oscila en e 2.400 y 3-60.000 po g amo de suelo seco. No pudo halla se co elación alguna en e los ipos de suelos es udiados y el núme O' de lí icos exis en es, pues obse amos una g an díspe sión de esul ados pa a ipos simila es de suelos. No hemos podid.o es ablece el ado o ac o es que de e minan es a dispe sión die esul ados, áunque pensamos que una de las po sibles causas sea las di e en es echas de la omas de mues �as. De igual o ma, no se ha podido es ablece una elación en e pH de los suelos analizados y el núme o de mic oo ganismos lí icos encon ados. Al habe es udiado suelos, cuy.o in e alo de pH es pequeño, cabe la posibilidad de que es a sea la causa undamen al de la al a de co espondencia en e núme o de lí ic.os y pH del suelo. No se ha encon ado una elación en e ipo de suelo y dis i bucÍón de especies. Los g upos mic obianoS! aislados en es e abaj.o co esp.onden a la lo a lí ica exis en -e en los suelos en el momen o de la oma de mues as, siendo, posiblemen e, in luenciada la p e� dominancia de un g upo u o o po las condiciones climá icas exis en es en dicho momen o. En gene al, de los 31 2 mic oo ganismos lí icos apa ecen como dominan es los pe enecien es al géne .o S :ep omyce'S'. ARS PHARMACEUTICA 119 Analizando los po cen ajes de ac uación lí ica de las cepas ais ladas sob e los dis in os ipos escogidos ( abla II), obse amos una mayo capacidad lí ica del g upo de los� Ac inomice os. Las Eubac e ias p esen an una mayo ac i idad lí ica que My xobac e ias, excep o pa a los mic oo ganismos G am posi i os. Nues o es udio ha pe mi ido pone ·en e idencia una ac i idad lí ica en la mÍc o io a de odos los suelos analizados. Es a capacidad de p oduci enzymas lí icos es ex ensi a a Ac i nomice os, Myxobac e ias y Eubac e ias. Es e conocimien o sugie e la posibilidad de emp ende un con ol biológico de los mic oo ganismos i opa ógenos con el empleo de an agonis as lí icos au óc onos, con lo que se e i a ía uno de los p oblemas de la lu.cha biológica, co no es ·el de la adap ación al suelo, donde an a se .empleados los an agonis as adecuados. BIBLIOGRAFIA (1) KAMAT, N. K. and DHALA, S. A. (1966).-Indian J. Mic obio!. 6, 9. (2) CALLAO, V., ALVARADO, R., SEDAMO, A., OLIVARES, E. Y MONTOYA, E. (1966). Mic obiol. Espa. 19, 45. (3) RICHMOND, M. H. (1955).-J. Gen Mic obio!. 16, I . (4) SALTON, M. R. J. (1955).-J. Gen. Mic obio!. 12, 25. (5) DHALA, S. A. (1972).-Comunicación pe sonal. (6) CONGREGADO, F. (1975).-T·esis Doc o al. Ba celona.