Inducción de la ovulación y fecundación artificial en la coneja

Rep oducción Inducción de la o ulación y ecundación a i icial en la • coneJa M. Ba aglini, F. Cos an ini, C. No dio Baldisse a y C. Ru ini (XV II Sympos i um In e nacional de Zoo ecnia, ab il 1 98 2. Milàn) In oducción Se conoce pe ec amen e que la o ula- ción de la coneja es induc id a median e el coi o, el cua I desencadena po ia ne iosa una sec eción desde l os núcleos hipo alami- cos de la neu oho mona go nad olibe ina (GnRH), que es un decapép ido que ue ais- lad o y ep oducido po sln esis ha ce unos 10 años. La ho mo na al canza po (a po al la hipó isis an e io y es i mu la la sec eción de gonado oci os, ho monas gonado ópi- cas, o ll culoes imulan es y lu ees imulan- es, es a úl im a esponsab le en úl imo é - mino de la dehiscencia de los oll cu l os o a- icos. Ello indica que la posibilidad de e ec- ua ecundaciones ins umen al es es a el a- cionada con la posibilidad de p oduci se un pico plasma ico de gonado opinas, lo que en condicion es no m ales es a inculado con el es imulo de la mon a. Po es a azón, se han e ec uado num e osos in en os de in- yec a conejas con ho m onas go na do ópi- cas con obje o de induci l es la o ul ac ión. Pau le y cols (1979), obse a on que l as gonado opi nas p o ocaban la o mación de a n i cue pos en can i dades no ables, lo cual con ibula a edu ci la e ilidad de las mad es y an scu idas 4 o 5 aplicaciones l as cone jas se h acen p ac icamen e es é il es, con g a es pe juicios pa a el cunicul o . D esde el año 1973 Humph ey y col s. ob- se a on que la gona doli be i na sin é ica po- dia induci la o ulación de la co neja s in in- con enien es. Sus esul ados han sido oma- d os po nume osos in es ig ado es ci ados ab il 1983 I cunicul u a po Adams (1976) en su esumen sob e la ecundación a i ici al de la coneja. L os abajos de Pau le y co l s. (1979) so- b e ecu nd ac ión expe im e n al de la co n eja con o ulación inducida po GnRH (Lu al) o de un p oduc o simila (Recep al) son si- mila es a los es udios de Du y-Ba be (1976). C. Ru ini (1978) y Adams (198 1) . Según las in es igaciones de Ru ini y cols. (1978) se han obse ado. que una ho a d espués de la inyección de una ho mona gonadolibe ina sin é ica a la dosis de 10 mcg. po ia pa en e al, las conejas p esen- aban un mayo po cen aje de acep ación del mac ho y una mayo incidencia de ges a - ciones a é mi no con espec o a las mad es que ue on inoculadas con sue o isiológi- co d u a n e los iempos que se e ec ua on l as compa acion es. L os es udi os eanudados con obje o de con ola las in ducciones de · la o ulación 'a lo la go de odo un año sola , consideníndose los pe lodos en que po di- e sas in luencias dec ece la e ilidad. De o ma pa icula se ha is o que e a in e esan e el a amien o con GnR H a las hemb as que no hablan acep ado el macho el dia p eceden e, ensayando can idades de neu oho monas. Todo ello ha pe mi ido es- udia l as espues as de la insem inación ins- umen al an e di e sos es lmul os ho mo- naies. Ma e ial y mé odo a) In dl.!cción de la o ulación. Se e ec uó un es udio en un coneja con 350 mad es 63 de aza Neozelandesa bl anca, di ididas en es coneja es. En o al se e i ica on 874 obse aciones, con g upos de 20 a 25 ma- d es. El p oduc o GnRH se inyec ó po (a subcu anea, da n dose la dos is en 1 ml. de so- lución isiológica una ho a an es de la cu- b ición na u al, la cual se e ec uaba de a :ue do con los mismos c i e ios de la g an· ja, sin ene en cuen a el momen o del cielo es al. En p ima e a y en e ano se adminis· a on 10 mcg. de GnRH po coneja que hab(a ehusado al macho el d(a an e io no inoculada p e iamen e con la ho mona. Du- an e los meses de mayo, junio, julio y agos o, ademiÍs se e ec uó una p ueba com- pa a i a en e adminis aci ones de 10 y 5 mcg. de GnRH. Simul aneamen e en o .o coneja de 100 mad es de aza Neozelandesa se con oló la e ili dad a lo la go de un año, eal izandose 400 p uebas en o as an as cub iciones na - u al es en la ase de es o. Cada mes ue on ano ados el núme o de cub iciones, el de ges ac i ones posi i as, pseudoges aciones y núme o de gazapos i os y mue os. O a g anja de ipo amilia e ec uó la p ueba en conejas de ipa Neozelandés y Cali o nia, pa a e la posible e icacia del GnRH en o ma de decapép ido analogo a la gonadolibe ina hipo alamica que ue in- yec ada po (a in am uscula una ho a an- es de la ecundación na u al. Después de una in es igación p elimina sob e un pe- queño g upo de mad es, inoculadas con 1 mcg. no se mos ó ningún esul ado po- si i o, lo mismo que o o g upo que ecibió 2 mcg. de GnRH/LA, independien emen e del pe (odo es al en que se haliaban. Los g upos se in i ie on sucesi amen e, las hemb as con oles e an p esen adas al macho en pe (odo de es o e iden e, mien- as que las a adas se inyec a on sin ene en cuen a el colo de la ulba, cub iéndose- las una ho a después de la inyección. Con ello ue posi ble a e igua que poca iempo después de la inyección de gonadolibe ina apa eci'an mani es aciones de celo. Es a p i- me a se ie de expe iencias se e ec uó en p i- ma e a, con una segunda ase sob e o os g upos, pe o en in ie no. b) Fecundación a i ic ial. En e el 22 de eb e o de 1980 y el 2 de ma zo de 1982 se 64 e ec ua on nume osas p uebas de insemina- ción a i icial (2.657 inseminacion es) sob e, un o al de 642 conejas de aza Neozelan· desa y Elco (h(b ido). El espe ma ue ob e· nido po agina a i icial diluyéndose el eyacu lado a 1/10 en sol ución is-bu e e inoculado a dosis de 0,5 cc. po hemb a. La o ulación ue inducida inyec ando po (a subcu anea una ho a an es de la e· cundaci ón los siguien es p epa ados: -GnRH sin é i co a la dosis de 10 mcg. cabeza (Bioda a). -GnRH/LA de la ga du ación a dosis de 2 mcg. y 1 mcg. po cabeza. -GnR H nonapép ido (Recep al) a la do· sis de 0,8 mcg. po cabeza. L os da os ob enidos ue on los siguien- es: a) Po cen ajes de pa os en l os dis in os meses del año. b) Va iaciones indi iduales de ja ecundi- dad. c) Respues a de la inducción de la o ul a- ción conseguidas con di e sas dosis y i pos de neu oho monas. d) I n luencia del g ado de madu ez sexual -nul (pa as o plu (pa as. e) E ec o de la ase del ciclo es al e· niendo en cuen a la colo ación de la ulba (anes o - blanca; p oes o - osa; es o - oja; me aes o -amo a ada) y ) Du ación del pe (odo en e pa os y núme o de gazapos i os y des e ados. R es ul a dos a) O u lac ión inducida, Los esul ados e- e en es a la p ueba de inducción de la o u- lación con 10 mcg. de gonadolibe ina sin é- ica, a lo la go de un año sola , ienen en la abla 1, que demues a de o ma cla a có- mo du an e los meses in e nales y de p i- ma e a se ob ienen mejo es esul ados. Los da os se e ie en a l as inyecciones de 10 mcg. de gonadolibe ina sin é ica al dia siguien e al echace de la hemb a a se cu- bie a, se señalan en la abla 2 la cual indi- ca ela amen e cómo los mejo es esu l ados se die on en p ima e a y en in ie no; lo que pa ece impo an e es cons a a una media de ges aciones a é mino del 37 po cien o, lo cual sign i ica una ecupe ación de un nú- me o signi ica i o de hemb as en ase de ab il 1983 I cuni cul u a • Bebede o mon ado di ec amen e sob e el ubo PVC ígida 22 x 22 INOX. Re . 4. 001 TUBO. Re . 4. 101 Bebede o lNQX., mon ado sob e " ala gade a. DE 55 mm . Re . 4.304 DE 90 mm . Re . 4.307 E 120 mm . 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Da cs obse ados P ima e a Ve ano To al Obse aciones (n.O) Ges ación a é mino (% ) p oducción in ensi a, lo que posiblemen e iene un conside able in e és zooeconómi- co . En la abla 3 se compa an los esul ados ob enidos en 100 mad es con las inocula- ciones espec i as de 5 y 10 mcg. de GnRH sin é ico, ap eciandose cómo es a úl ima dosis de e mina la mayo pa e de l as ges a- cion es a é mi no, independien emen e del mes que se conside e, esu l ado que se ex- p esa de o ma g a ica en la igu a 1 . Como conclusión se puede deci que la inducción de la o ulación po inyección de gonadolibe ina, seguida de acoplamien o na u al o o zado, pe mi en ob ene un 222 319 54 1 46 29 37 buen po cen aje de ges aciones a é mino. con cla a ecupe ación de indi iduos que habían echazado al macho en una p ime a in ención. A p opósi o de los coneja es come ciales' cabe eco da que du an e el pe lodo de e- ano-o oño, se pudo ap ecia una ac i idad de muda con in luencia nega i a en muy di- e sos machos, los cua les echaza an a la hemb a, incl uso cuando és a p esen aba c la - as mani es aci ones de ce lo. Po o a pa e, amblén muchos casos de cub iclones die- an esul ados in ecundos. Los da os de la explo ación de 100 mad es ien en especi i- cados po meses en la abla 4, dandose un Tabla 3. Rendimien os ep oduc i os de mad es inoculadas con dos dosis de GmRH, una ho a an es de la cub ición. 5 mcg. GnRH 10 mcg. GnRH Obse aciones (n.O) 100 100 Acep ación na u al del macho (% 52 59 Acep ación o zada del macho (% ) 44 37 Rechaçe del macho (% ) 4 4 Ges ación nega i a (% ) 73 55 Ges ación a é mino (% ) 23 41 ab il.1983 I cunicul u a 65 Tabla 4. Co mpo amie n o ep oduc i a de 100 mad es, sin inducción ho monal exóge na a la o ul ación. Mes/ano 5al os Ges aclones Mayo 1 979 63 39 Junio 75 44 Ju l io 43 21 Agos o 39 10 Se iemb e 49 11 Oc ub e 41 13 No iemb e 56 16 Diciemb e 43 17 Ene o 1 980 39 23 Feb e o 35 18 Ma zo 22 11 Ab il 35 26 To al 540 46 % - 60 50 40 -- ~ -B ;; ~ ~ ¡::: ~ ~ p ;; V ~ ::; ~ ::: ~ ;; ::: ~ ;:: ;; ~ ~ V 30 20 lO O ma yo j un io julio agos o, 5e udo-ges· Pa o s Nacldos "acldos i os Temp. m e- aclones % l os po pa o d ia o c . 5 54 237 6,08 20 2 56 1 78 5,24 23 - 49 26 0 6, 19 23 - 26 81 3,85 25 5 12 1 05 10,5 20 3 24 37 6, 17 16 1 27 26 2,6 14 6 26 121 8,07 13 6 44 67 6,09 14 1 49 58 3,41 14 - 50 1 28 7,53 16 2 69 43 3,9 1 17 1 2% - 1. 3 41 - - po cen aj8 de g a idez media del 46 po cie n o con un 1, 8 po cien o de mo al idad pe ina al -con una media de 6,15 nacidos i os po camada. La e olución de la ecun- didad con las 1 00 mad es iene exp esada g a icamen e po las igu as 2 y 3. Po lo que se e ie e a la p ueba G n R HI LA ipo decapép ido, puede deci se que en la p ime a se ie de expe iencias, con las cu· b iciones e ec uadas en los meses de ma zo y ab il y ul e io in e sión de l os g upos pa- a los meses de mayo y jun io, de ec a on mejo es e n dimien os en las mad es cuya o ulación ue inducida con el p oduc o de acción gonadolibe ínica. En la segunda se ie de p uebas, l os in en- os de cub ici6n ea l izados en ene o d ie on mejo esul ado l os animales de con ol, si bien a pa i de mayo ol ie on a da me- jo es esul ados los de las mad es cuyas o ulaciones es u ie on con oladas po las neu oho mon as. La ab la 5 indica los esul- ados en o ma esumida, en ella se pone de mani ies o cómo el a amie n o con GnRH- LA dio unüS esul ados ep oduc i os no - males, con la en aja adicional de ob ene se un mayo núme o de gazapos i os y des e- ados. b) Fecundación ins ume n al. Figu a 1. Po cen aje de ges acl ones en mad es a adas con 5 1-' 9 ::3 y con 10 1-' 9 O de Gn RH sln é co. 1. Va iación de la asa de pa os a lo la - go del año: El es udio de la igu a 4 in di ca 66 ab il 1983 Icuni cul u a pa lOs • 90 JO O),i! EFHAm.s,s Figu a 2. Ma c ha de la e llldad . , . li • l''''' .• ' .' '" '" " E Iol ,I meses Figu a 3. Nacidos l os/pa o. e , • a _ J j n J m'lI4!' cla amen e cómo los mejo es esul ados CO- espondie on a los meses de eb e o (69,6 po cien o) y ene o (64,3 po cien o), los esul ados de los meses de ab il y mayo ue on buenos (media del 61,8 po cien o), .medioc es los de no iemb e (54,5 po ci en- o), julio (53,8 po cien o), diciemb e (52,5 po cien o), ma zo (50,9 po cien o) y agos o (49,8 po cien o), mien as que ue- on cla amen e insa is ac o ios los ob eni- dos en los meses de junio (39,9 po cien o), se iemb e (36,1 po cien o) y oc ub e (34,1 po cien o). Du an e el pe lada de se iem- b e-diciemb e se e ec ua an sólo dos cub i- ciones al mes, mien as que en el pe lodo es an e se e ec ua on en e 5 y 10 insemi- naciones mensua les. Figu a 4 . Va iaclones de la as a de pa os so b e hemb as insemina das con semen dilul'do a 1:10 con T l s.bu e ). Tabla 5. Rendimien as ep oduc i as de 40 hemb as en un caneja de ipa amilia . P ueba Da os obse ados ~~b iCi6n después de inyec a GnR H /LA Cub ici6n na u al expon anea Cub iciones e ec uadas (% ) 88 81 Pa os, n.o de 15 16 Gazapos i os 98 87 1 Gazapos des e ados 85 80 (22 O) Nacidos/camada 6,76 6,53 Cub iciones e ec uadas (% ) 89 78 Pa os, n.o de 14 14 Gazapos i os 100 94 2 Gazapos des e ados 97 87 (18 O) Nac idos/camada 7,89 7,23 ab il 1983 I cunicul u a 67 2. Va iaciones indi iduales. Los esul a- dos de la alo ación indi idual de las ma- d es pe mi en ap ecia una cla a in luencia de cada an imal a la inseminación a i icial. Sesen a conejas (31,9 po cien o) p oduje on índices de pa os in e i o es al 37,5 po cien o, 62 conejas (33 po cien o) die on alo es comp endidos en e el 37,5 y el 50 po cien o, 46 (24,5 po cien o) pa ie on en e el 50 y el 75 po cien o, mien as que 20 (10,6 po cien o) lo hicie on en e el 75 y el 100 po cien. 3. Respues a a la ho mona. Las dis in as ho monas u ilizadas esul a on ú iles, pe a la que se compo ó mejo ue la GnRH/LA a 2 mcg. po mad e que log ó un 61,9 po cien o de pa os, m;en as que la o ma de nonapép ido (Recep al) lo hizo en un 53,2 po cien o y el GnRH sin é ico en un 45,3 po cien o. 4. E ec o del g ada de madu ez sexual y de la ase del ciclo es al: El analisis del g a- do de a iación de l os esu l ados en unci ón de la madu ez sexual y de la colo ación de la ulba, dio alo es sig ni ica i os, así po ejempl o, l as nulípa as inseminadas pa ie on en un 62,7 po cie n o, mien as que las mul ípa as lo hicie on só lo en un 48,8 po cien o. Po lo que se e ie e a la colo ación de la ulba, los po cen ajes maximos de ges- . aciones se die on cuando las hemb as inse- minadas enían colo ación oja (73 po cien o) con un ni el in e io si la ulba e a osa (55,6), menos aún con la ulba amo a- ada (39,2 po cien o) y el mínimo con la ulba blanca (36,8 po cien o). El canÍG e colo ación de la ulba ha sido u ilizado pa a es udia con mayo de alle la espues a de l os animales a las dis in as ho - monas. Cuando las mad es es aban en celo se log a on maximos esul ados con el GnRH/LA an o a dosis de 1 como 2 mcg. (79-78,5 po cien ol, siendo bas an e bue- 68 nos con gonadolibe ina sin é ica (54,6 po cien o-. Du an e la ase de p oes o - ul- ba osa- l as di e encias en e l as ho monas comenza on a se mas ue es, pues se pasó de l 68,2 po cien o pa a la GnRH/LA a 2 mcg. a s610 un 33 po cien o con GnRH. En la ase de anes o la ho mona GnRH/ LA a 2 mcg. consigui6 l og a un 51,2 po cien o, mien as que las o as ho mon as só - lo ob u ie on en e el 21 y el 22 po cien- o. En la ase de me aes o, es deci , cua n- do la u l ba es a amo a ada, la asa de ges a- ci ón suele se baja, si bien con el GnRH /LA a 2 mcg. dio un 39 po cien o, con a un 29 po cien o ob enido con las o as ho - monas. 4. Du ación del pedada en e pa os y núme o de gazapos nacidos y des e ados. Uno de los coneja es conside ados dio un mayo núme o de gazapos nacidos de me- dia po ecundación na u al (8,0) que con la a i icial (7,5), ci a que esul ó in e sa en o o coneja en que la ecundación na u- al dio una media de 6,15 nacidos i os po pa o, en an a que la ecundaci6n a i i- cial, con o ulaci6n inducida, log ó una me- dia de 7,5. Po lo que se e ie e a la mo a- lidad de los gazapos esul ó la no mal, con un 25 po cien o de mo alidad p e-des e e, de las cua les un 14 po cien o co espon- dían al abandono de la camada en e a, con pé dida de odos los pequeños, lo que e a debido a causas ajenas a la insem ina ción u o ulación inducida. El pe íodo en e pa os log ado ue 55,5 d ías ci a que puede consi- de a se buena o no mal. U na ul e io expe iencia con es as sus- ancias induc o as de la o ulaci6n puede mejo a nues o conocimien o ace ca del ciclo anual de las sus ancias ho mon ales y señala el momen o mas opo uno pa a in- duci l as o u la ciones. ab il 19 83 I cu nicul u a