Frotis vaginales e inseminación artificial en la perra

F o is aginales e inseminación a i icial en la pe a Resumen. En el p esen e abajo se desc ibe la écnica de ealización de o ís aginales en la pe a, sus indicaciones y su in e p e ación. Así mismo, se discu en el mé odo yla u ilidad de la inseminación a i icial en la pe a. C. Dumon Palab as Cla e: F o is aginales; Inseminación a i icial, Pe a. Co espondencia: Clínica Ve e ina ia Sain -Roch, 10, Rue Sain -Roch, 78200 Man es-la-jolie, F ancia Abs ac s _ In his pape , he me hod and applica ions o aginal smea s in he bi ch a e desc ibed. In he second pa o he a icle he di e en echn iques o a i icial insemi- na ion and bei ad an ages and disad an ages a e discussed. Key Wo ds: Vaginal smea s; A i icial inse nina ion, Bi ch. In oducción _ Toda ía se solici an más los se icios del e e ina io especialis a en animales de compañía pa a e i a que pa a a o ece la ep oducción de las pe as y de las ga as. Sin emba go, la in e ilidad canina oma cada día mayo impo ancia en nues as consul as, con el alo c ecien e de los pe os de pu a aza, el desa ollo de la cino ilia y de los c iado es a icionados o p o esionales. Una hemb a aliosa que ehúsa la mon a o que es es é il as el acoplamien o es una decepción pa a el c iado , un mo i o de consul a cada ez más ecuen e, e incumbe al e e ina io adqui i los conocimien os necesa ios pa a de e mina las causas y si es posible emedia las. Además, jun o a es as demandas o muladas di ec a- men e, en muchas ocasiones un in e oga o io p o undo y adecuado con ocasión de una isi a u ina ia de una pe a, nos e ela á que no ha es ado en celo desde hace iempo, al ez que sus celos son muy i egula es o bien que se la había in en ado hace c ia y había echazado la mon a. No a del di ec o de la e is a: Ag adecemos al O . An oni P a s, de la clínica e e ina ia Rocabe i (Ba celona) la aducción de es e a ículo del ancés al español. 119 Hay, po an o, en lo que espec a a la in e ilidad canina, consul as o muladas di ec amen e y consul as "p o ocables" en p opie a ios que no sospechaban que una in e ención de su e e ina io e a capaz de solucio- na su p oblema. La in e ilidad canina puede de i a de múl iples e iologías, pe o es adís icamen e el echazo de la mon a o la mala sinc onización o ulación-mon a, ep esen an la mayo ía -eI80% ap oximadamen e- de los allos de la ep oducción en es a especie. Si bien la inseminación a i icial esuel e los echa- zos de la mon a, no se e á co onada po el éxi o más que si se e ec úa en el buen momen o y la ealización de o is aginales es, ac ualmen e, la mejo mane a de de- e mina ese "buen momen o". Así pues, o is aginales e inseminación a i icial canina, que son dos emas in e dependien es incluso si el in e és de la ci ología aginal no se limi a a la insemi- nación y si, o os medios -algunos de ellos muy p ome- edo es-, es án ac ualmen e a la disposición del clínico pa a de e mina el momen o de la o ulación en la pe a. Pa a un desa ollo más didác ico es udia emos suce- si amen e: F o is aginales: ealización, in e p e ación, aplica- ciones. Inseminación a i icial: la cual, en la pe a, puede se ealizada con semen esco C'ayuda a la mon a") o con semen congelado. A. F o is aginales _ El celo de la pe a es el es imonio de una isiología sexual con mani es aciones cíclicas y las células obse - adas en el o is aginal son el e lejo de odas es as a iaciones, del uncionamien o y del es ado de su apa a o geni al. Examina emos sucesi amen e la ealización, la in e - p e ación y las aplicaciones de es a p ueba. 35 Re is a de AVEPA. Vol. 9, N° 3 1989 Fig. 1. P epa ación del o is. . . • Fig. 3. Células epi eliales yhema íes eñidos con el mé odo de May G ünwold-Gíe nsa. Realización 1. Toma de la mues a Se u iliza un escobillón es é il, la go, como mínimo de 15 cm, humedecido con una go a de sue o isiológico (el agua des ilada o el agua del g i o, al e an las células). Es a pieza debe in oduci se a lo la go del bo de supe io de los labios ul a es, a in de e i a la osa del clí o is (mo imien o que se ealiza con el escobillón e ical). Inmedia amen e, se la hace bascula hacia la ho i- zon al y pene a delicadamen e lo más p o undamen e posible. T as algunos mo imien os de o ación, se e i a len- amen e hacia a ás. 2. Ex ensión (Fig. 1) Es con enien e en onces hace o a el algodón sob e el po aobje os y sob e odo, nunca o a , pa a no al e a las células. No ol e a pasa dos eces po el mismo si io. Es a ex ensión debe ealiza se inmedia amen e, 36 Fig. 2. Células epi eliales aginales descamadas eñidas con azul de me ileno. Fig. 4. Ba e ía de colo an es pa a la inción de Ha is-Scho . as las oma de mues a pa a e i a la desecación. 1. Fijación El po aobje os se sume ge inmedia amen e, du an e cinco minu os, en una mezcla alcohol-é e (AA), que ealiza la ijación de la mues a. El o is así ijado se puede conse a 15 días an es de se eñido. 4. Tinción Pueden e ec ua se es inciones: a) Tinción monoc ómica al azul de me ileno (Fig. 2). No pe mi e pone en e idencia las a inidades de co- lo ación de las células aginales y, po an o, la in e p e- ación del o is se basa en su o ma y en la isualización de su núcleo. b) Tinción de May G unwald Giemsa (Fig. 3). Tiene la en aja de su apidez (menos de un minu o), y de pone muy bien en e idencia leucoci os y hema íes, pe o la di e enciación de las células aginales se basa 120 C. Oumon. F o is aginales e inseminación a i icial en la pe a. Tabla l. Tinción de Ha is-Scho Saca la ex ensión del ijado y eñi la inmedia amen e. Alcohol de 70°: sume gi 10 eces. Alcohol de 50°: sume gi 10 eces. Agua des ilada: sume gi 10 eces. Hema oxilina de Ha is: 2 minu os. Agua des ilada: un pase. Agua des ilada: un pase. Alcohol amoniacal: 1 minu o. Agua des ilada: un pase. Alcohol de 70°: pase. Alcohol de 95°: pase. Colo an e de Scho : 2 minu os. Alcohol de 95°: pase. Alcohol de 100°: pase. Seca y obse a al mic oscopio . . ' , , . . ' • e· Fig. 6. F o is aginal de una pe a en el inicio del p oes o. Tinción de Ha is-Scho exclusi amen e en los mismos c i e ios, de o ma y de isualización de los núcleos, que la inción p eceden e. e) Tineión de Ha is Sebo (Fig. 4. Tabla I). Es la inción p e e ible. Cla o que son necesa ios 15 minu os pa a su ealización, pe o las células aginales se di e encian pe ec amen e po a inidades de colo ación que acili an la lec u a de mane a conside able. In e p e ación Deben ene se en cuen a es elemen os p incipales en la lec u a de un o is aginal: -P esencia de hema íes o de leucoci os. -Po na de las células, p esencia o ausencia de núcleo y o ma del núcleo, caso de exis i . -A inidad de colo ación del ci oplasma de es as célu- las (azul basó ilo, ama illo-ana anjado = acidó ilo). l. Las células aginales. Pueden obse a se es ipos de células aginales: 121 •• ..'. , Fig. 5. F o is aginal de una pe a en anoes o. Tinción de Ha is- Scho Fig. 7. F o is aginal de una pe a en mi ad del p oes o. Tinción de Ha is-Scho . a) Células pa abasales -Diáme o pequeño. -De o ma edonda y o al. -Núcleo g ande. -Colo ación basó ila. b) Células in e medias -Con o nos i egula es. -Núcleos bien isibles. -Colo ación basó ila y/o acidó ila (según el momen- o de ob ención de la mues a). e) Células supe iciales -Con o nos i egula es. -Núcleo picnó ico o ausen e. -Colo ación acidó ila (en ocasiones basó ila al p in- cipio). 2. Ciclo sexual y o is aginal Según la ase del ciclo sexual en la que se ob enga la mues a, el examen mic oscópico del o is se á muy 37 Re is a de AVE A. Vol. 9, ND 3 1989 • • • ,~ • • Fig. 8. F o is aginal de una pe a en el inal clel p oes o. Tinción de Ha is-Scho . di e en e. La in e p e ación con i ma á o desmen i á los sín omas clínicos y la ana nnesis. a) Ances o (Fig. 5) -F o is pob e en células. -Ningún hema íe, algunos leucoci os. -Las células aginales son células pa abasales basó- ilas, pequeñas, de núcleo g ande, a menudo ag upadas "en columnas". Es a ase, de du ación a iable (2 a 8 meses, según las azas o los indi iduos), no se acompaña de sín omas ex e io es: es la ase de eposo sexual. La p esencia de nume osos leucoci os en un o is de anoes o indica una in ección aginal o u e ina. b) P oes o • Desde el p incipio del p oes o (Fig. 6), clínicamen- e ca ac e izado po la apa ición de un edema ul a y de pé didas de sang e, pueden obse a se: -Mayo núme o de células. -Esencial nen e células in e medias y algunas células supe iciales, con núcleo picnó ico. Colo ación basó íla. -Hema íes muy nume osos, sin leucoci os. • A mi ad del p oes o (Fig. 7) -El núme o de células aginales aumen a aún más. -Disminuye el núme o de células in e medias, au- men a el núme o de células supe iciales. El núcleo es picnó ico, la colo ación basó ila y/o acidó ila. -Abundan es hema íes, sin leucoci os. • Al inal del p oes o (Fig. 8) -Casi exclusi amen e, células supe iciales, de nú- cleo picnó ico o anucleadas, colo ación esencialmen e acidó ila. -Disminución del núme o de hema íes, sin leucoci- os. Es á ce cano el momen o de la o ulación. Con iene ealiza inmedia amen e una p ime a mon a/insemina- ción. Según las pe as, el p oes o e oluciona en 5-10 días. 38 Fig. 9. F o is aginal de una pe a en el es o. Tinción de Ha is-Scho . e) Es o (Fig. 9) Sob e iene en onces el es o: -Las células aginales son ex emadamen e nume o- sas. -Se a a de células supe iciales que a inizadas, de colo ación acidó ila y anucleadas, p esen ándose en a- cimos. -No quedan p ác icamen e hema íes. Sin leucoci os. Es el momen o de la o ulación, eó icamen e de la acep ación y de la búsqueda del macho y as dos días de obse ación de un o is de es as ca ac e ís icas -que se pod á obse a du an e 5-10 días-, hay que p ac ica una 'nue a mon a o inseminación. d) Me aes o (Figs. 10-11) El o is se modi ica de mane a b usca: -Apa ición b u al de células pa abasales, basó ilas, o ales o edondeadas, y con mi g an núcleo, jun o a células in e medias. -Es as células poco nume osas, a menudo unidas a glóbulos blancos, ocupa án p og esi amen e odo el campo mic oscópico. -No hay glóbulos ojos. Es el pe íodo de nidación o de pseudoges ación, que du a á de 60 a 120 días, según las pe as. Comen a ios 1. Momen o p eciso de la o ulación La o ulación se localiza en el momen o del es o, pe o los o is pe manecen idén icos a ios días y si el clínico no ha seguido la e olución del o is desde el inicio del p oes o, no puede de e mina con p ecisión que el acompla nien o o la mon a inmedia amen e p e- conizadas hayan ocu ido en el momen o adecuado, no siendo ecundable el ó ulo más que du an e 48 ho as. Po el con a io, en cuan o se e apa ece la p ime a célula pa abasal de me aes o, se puede a i ma -desg a- ciada nen e a pos e io i-que la o ulación ha enido luga 122 C. Dumon. F o is aginales e inseminación a i icial en la pe a . .... ,- -c.-" "?- •. • Figs. 10-11. F o is aginal de una pe a en el me aes o. Tinción de Ha is-Scho . Fig. 12. F o is aginal de una pe a con una in ección u e ina. Tinción de May G ünwald Giemsa. seis días an es. Es a idea undamen al demues a la necesidad de segui la e olución de los o is desde el inicio del celo pa a op imiza las posibilidades de éxi o de la ep oduc- ción. Ello pe mi e, a la ez, a pos e io i, in o ma al p opie- a io que se ha ac uado a iempo o demasiado a de. Además, es as in o maciones son muy impo an es pa a los celos p óximos. En e ec o, sí hay a iaciones de una pe a a o a,pe o una pe a o ula siemp e el mismo día de sus celos. 2. Indice acidó ilo Es e índice (lA núme o cie células acidó ilas núme o cie células basó ilas ) es máximo, es cleci , supe io a 0,5, en el momen o de la o ulación. Desciende po debajo de 0,1 a los 4 o 5 días, as un coi o (o una inseminación) ecundan e. Si no ha habido ecundación, hab á que espe a es semanas pa a que alcance es os alo es. Es e concep o puede se pues o en p ác ica de mane a p o echosa como elemen o de diagnós ico p ecoz de ges ación. 123 Figs. 13 Y 14. F o is aginal de una pe a en el inal clel es o y en el me aes o, espec i amen e. Tinción de Ha is-Scho . 1. In ección u e1''Ína(Fig. 12) Una imagen de me aes o que se acompañe de un g an núme o de leucoci os, indica una a ección aginal o un p oceso u e ino (me i is, piome a). 4. Una posible con usión: {in de p oes o/inicio de me aes o (Figs. 1)-14) Al inal del p oes o, las pequeñas células in e me- dias oda ía basó ilas y nucleadas, pueden con undi se con células pa abasales de mes aes o en lo que hace e- e encia a meclicla y colo ación. La di e enciación debe es ablece se po los con o nos angulaclos y los núcleos pequeños de las células in e meclias, a di e encia de los con o nos edondeados y de los g andes núcleos de las células pa abasales. Finalmen e, y sob e odo, las células sanguíneas con i man el diagnós ico (hema íes = p o- es o, leucoci os = me aes o). Aplicaciones 1. Elección del momen o óp imo pa a la mon a o la inseminación Es a es sin duda la p incipal aplicación de los o is aginales: -Mon a p ác icamen e segu a. 39 Re is a de AVEPA. Vol. 9, N° 3 1989 -Economía del macho. -Economía de desplazamien os inú iles, si los ep o- duc o es son de zonas alejadas. -Economía de pajuelas (inseminación con espe ma congelado). E ec i amen e, si bien es adís icamen e la o ulación ocu e en e el10º y e114º día del celo (80% de casos), ello no es siemp e así. Una de cada cinco pe as se sale de es a egla gene al y debe suma se ambién a ello el e o siemp e posible del p opie a io espec o al e da- de o inicio del celo. Son p ecisamen e es as ep oduc o as " ue a de lo no mal", las que dan p oblemas y jus i ican una consul a con el e e ina io. Hay que sabe que de e minadas pe as acep an al macho en el inicio de su pe íodo de ecundidad, limi ado a los dos días de ida de.los ó ulos madu os, y que o as echazan al macho que se les p esen a, aunque eó ica- men e debe ían acep a lo. F o is aginales e inseminación, son los mé odos u i- lizados más co ien emen e pa a ajus a la adap ación de los cinco días de ida en ú e o de los espe ma ozoides a los dos días du an e los cuales los ó ulos son ecunda- bles. 2. Ciclos ano ula o ios -De e minados o is, a pesa de se seguidos egula - men e desde el inicio del p oes o, no e olucionan de la mane a clásica. -Es cla amen e posible obse a un paso sin ansi- ción desde una mi ad de p oes o a un me aes o. -Puede a i ma se en onces que no ha habido o ula- ción, y con 'ello se apo a la p ueba concluyen e -que pod á con i ma se con una asa de p oges e onemia- de una in ecundidad po madu ación olicula incomple a. 3. Con ol de la ep oducción a) In e upción de la ges ación La e apia abo i a no es á exen a de posibles iesgos en hemb as ep oduc o as de g an alo ; es más sensa o en ales casos ealiza un o is aginal, as una mon a indeseada. Si el día de la mon a se obse a una imagen de me aes o o de inicio de p o-es o, podemos desa- conseja una medicación inú il. b) P e ención del celo (p oges ágenos) o a la in e sa, desencadenamien o o p o ocación del celo (p o ocolos de es imulación) Ninguna de las dos ac uaciones debe aconseja se ue a de la ase de anoes o. Asimismo es es a ase de anoes o la elegida pa a la o a iec omía pa a cas ación. c) Con i mación de la mon a (Fig. 9) Algunas ho as después dei supues o coi o, pueden 40 obse a se en el o is la p esencia de espe ma ozoides. d) P esunción de ges ación Si el índice acidó ilo es muy bajo al inicio del me aes- o es posible con i ma , con mucha p obabilidad, un diagnós ico p ecoz de ges ación. 4. Pa ología del ac o geni al (Fig. 12) Los leucoci os abundan es, o la p esencia de células ano males o ien an hacia una in ección o una lesión umo al de la agina o del ú e o. Los o is aginales es án indicados, de hecho, en oda in es igación semiológica del apa a o ep oduc o emenino. Conclusión Si bien el p incipal in e és de los o is aginales adica en la de e minación del momen o de la o ulación, indispensable pa a la ealización de la inseminación a i icial, sus aplicaciones no se limi an a es a indicación, sino que deben signi ica un examen de u ina pe ec a- men e dominado po el e e ina io especializado en pa ología de los animales de compañía. B. Inseminación a i icial. _ La inseminación a i icial, ampliamen e u ilizada en la c ía de animales de abas o, se u iliza en es as especies no malmen e a pa i de semen congelado ob enido de p ogeni o es selec os en una búsqueda de mejo as gené icas, de selección y de en abilidad económica. Den o de la inseminación a i icial canina, hemos de dis ingui la inseminación a i icial con semen esco, muy u ilizada y ácil de ealiza , de la inseminación a i icial a pa i de semen congelado, mucho más di ícil de lle a a la p ác ica que en las o as especies animales. Conside a emos sucesi amen e la inseminación a i- icial con semen esco -que se ía más adecuado cali ica de "asis encia a la mon a"- en sus indicaciones, su eali- zación p ác ica y sus esul ados, y luego a a emos de la inseminación a i icial con espe ma congelado pa a mos a sus pa icula idades, sus di icul ades y SllS pe s- pec i as. Inseminación a i icial con semen esco 1. Indicaciones El p oblema plan eado es muy simple: uno o dos c ia- do es han decidido hace c ia una hemb a con un se- men al, han espe ado al 10º día del celo de la pe a y es imposible el acoplamien o. ¿Po qué? Es es o, p ecisa- 124 C. Dumon. F o is aginales e inseminación a i icial en la pe a. Fig. 15. Neoplasia de ul a. Fig. 17. Es enosis aginal. men e, lo que el e e ina io end á que de e mina , an es de aconseja una "asis encia a la mon a". Exis en dos azones esenciales: -Incapacidad del macho. -Rechazo de la hemb a. a) Incapacidad del macho Con es e iologías posibles a plan ea : -Inexpe iencia del macho demasiado jo en. -Ausencia de libido en un macho demasiado iejo o bien inhibido po un modo de ida que lo ha man enido siemp e aislado de sus congéne es ( azas enanas de apa amen o). -A ección geni al o p os á ica. b) Rechazo del acoplamien o po pa e de la hemb a Gene almen e, la hemb a ehúsa el coi o po es mo- i os: -P oblemas ísicos. -P oblemas psicológicos. -Finalmen e y sob e odo: momen o inopo uno. • P oblemas ísicos El echazo de la mon a es á mo i ado po : -Les iones ul a es o aginales, que hacen imposible 125 Fig. 16. P olapso aginal. o dolo oso el acoplamien o: umo es (Fig. 15), p olapso aginal (Fig. 16), agini is o ul i is, eczema ul a o pe- i ul a , es enosis aginal (Fig. 17). -A osis e eb al, que hace muy dolo oso el cabal- gamien o del macho ( eckels, pequineses, e c.), -In oducción de pelos que se in e calan en e el pene del macho y la ul a de la hemb a, haciendo imposible la pene ación ( e ie s, bob ails ...). En oca- siones, es su icien e esquila la egión ul a pa a solu- ciona el p oblema. • P oblemas psíquicos -Las pe as ag esi as en enadas pa a gua da se lan- zan sob e odo congéne e que se les p esen a, incluido el semen al que se les ha escogido. Po el con a io, las pe as de apa amen o, que han i ido siemp e solas, se a e o izan al e a o o pe o y se echan en cuan o el macho in en a la mon a. Las ep oduc o as que ecue dan un coi o dolo oso, pueden echaza un nue o acoplamien o. Po úl imo, con iene sabe que las hemb as de Saluki acep an únicamen e machos de su aza. • Momen o inopo uno El o igen más ecuen e del echazo a la cópula se encuen a sob e odo en la inco ec a sinc onización mon a/ o ulación. Po ello, el e e ina io, an e odo, debe á dedica se a de e mina la co ec a sinc onización, el "buen momen- o". 2. Realización p ác ica -La inseminación a i icial con semen esco debe e- aliza se en es e apas: -Asegu a se de que la pe a es á en el pe íodo óp imo de ecundidad. -Ob ene y con ola el espe ma del semen al. -Inseminación p opiamen e dicha; es deci , in o- ducción del espe ma ecogido en el . ac o geni al de la hemb a. 41 Re is a de AVEPA. Vol. 9, N° 3 1989 a) ¿Lape a es á "apun o"? T as la o ulación, los ó ulos su en una madu ación de dos días en las ompas del ú e o y luego son ecun- dables du an e 48 ho as. Po su pa e, los espe ma ozoides únicamen e son e- cundados du an e 4 ó 5 días. Po ello es impo an e la p ecisión del momen o de la o ulación. En es os momen os hay es mé odos a disposición del e e ina io: -La ealización de o is aginales, es udiada an e io - men e. -La medición de la esis i idad del nucus aginal -La dosi icación de la p oges e ona en sang e. • Medición de la esis i idad del mucus aginal. Funda n n o: Se conec a una sonda, in oducida en la agina de una pe a en celo, a un ohme o pa a ob ene alo es de la esis i idad del mucus aginal, que se supe ponen a la cu a en que igu a el po cen aje de células aginales que a inizadas ( abajo de Günzel, e cuad o). A imismo,]. P. Mialo , ha demos ado que la cu a de la esis i idad del mucus aginal sigue la madu ación olicula y que su in lexión, que iene luga dos días después del pico de LH, indica la o ulación. De hecho, los esul ados ob enidos po es a medi- ción no son en odas las pe as an p ecisos como ha ían supone es as cu as- ipo. Sin emba go, se puede a i - ma que no hay nunca o ulación mien as que la esis- i idad del mucus aginal no sob epasa los 800 ohm. El p incipal in e és de es a medición, an simple como una oma de empe a u a es, sob e odo, limi a el núme o de o is aginales, mucho más la gos de hace . Con iene des aca que en el caso de la zo a, es a medición es muy p ecisa, y po ello se u iliza habi ual- m n e en los c iade os de zo os pa a pele e ía de los países escandina os. • Dosi icación de la p oges e ona en sang e La dosi icación de la p oges e onemia pe mi e p eci- sa el momen o de la o ulación. Tabla n. Di e en es acciones del semen canino Los alo es no males de 1 ng/ml du an e el anoes o se ele an en e 2 y 4 n/ml du an e el p oes o y el pico de LH, luego en e 4 y 10 ng/ml en el momen o de la o ulación, y inalmen e 15 a 80 ng/ml quince días, as la o ulación. El in e és de es a de e minación es iple: -Con i ma los o os mé odos de in es igación. -Cualquie labo a o io puede ealiza la en el mismo día, y muy p obablemen e, en un u u o p óximo es a án a disposición de los clínicos ki s de lec u a ápida. -Finalmen e, y sob e odo, la ele ación de la asa san- guínea de p oges e ona es el es imonio más iable de o ulación. Una p oges e onemia que no se ha "dispa ado" de su ni el base, pe mi e a i ma que el ciclo ha sido ano ula- o io. Una p oges e onemia supe io a 15 ng/ml demues a que, cie amen e, ha habido o ulación, pe o que ya es demasiado a de pa a insemina . b) Ob ención y examen del espe ma del semen al Una ez conside ada la hemb a como "a pun o", la segunda ase de la in e ención consis e en ob ene el espe ma del semen al y en asegu a se de su calidad. • Recogida del espe ma La elec o-eyaculación es inaplicable en el pe o (dolo y des ucción de los espe ma ozoides); la agina a i icial empleada habi ualmen e en las demás espe- cies, es inú il. Un simple mangui o de caucho o goma, e minado en un ubo plás ico, puede cons i ui odo el ma e ial pa a la ob ención. Siemp e es con enien e p o ege el ubo de la luz y man ene lo en e 37 y 40 "C (baño-ma ía). Po o a pa e, el mangui o no debe la a se nunca con de e gen es (e ec o espe micida). La e ección y la eyaculación se consiguen po masaje del pene ence ado en el mangui- o. La p esencia de una pe a en celo C'Tease ") acili a conside ablemen e las manipulaciones, aumen a el olumen del espe ma ecogido y su concen ación en Aspec o F acción U e al = P eespe ma Flemoso blanquinoso F acción Epididi na ia = Espe ma Espeso acuoso F acción P os á ica = Pos espe ma Cla o iscoso Eyaculado comple o Viscoso blanquinoso 126 42 Ob ención Volumen 30 a 50 segundos 0,2 a 2ml 2 a 3 minu os 0,5 a 6 mi 5 a 7 minu os 3 a 30 mi 7 a 10 minu os 4 a 35 mi Concen ación en espe ma ozoides <3,106 espe ma ozoides/ nl 400,106 espe ma ozoídes/ nl espe ma ozoides muy escasos ap oximadamen e 400,106/ml C. Oumon. F o ís aginales e inseminación a i icial en la pe a. Fig. 18. In oducción del semen con je inga de id io .. espe ma ozoides. En el pe o, la eyaculación es i ásica (Tabla II). En el caso de asis encia a la mon a, se u iliza odo el eyaculado. Cuando hablemos de semen congelado, e emos que únicamen e se congela á la acción epidi- dima ia, ica en espe ma ozoides. -Examen del .espe na Una go a de espe ma colocada en e po a y cu- b eobje os y obse ada al mic oscopio sin p epa ación, pe mi e ap ecia : -La concen ación en espe ma ozoides. -Su mo ilidad, yendo desde la inmo ilidad has a e - dade as ondulaciones, simulando olas. Laadición de una go a de colo an e Eosina-Nig osina (Tabla III) pe mi e p ecisa la p opo ción de espe ma o- zoides mue os ( eñidos de osa) y i os (que no se iñen): Pueden obse a se ambién o mas ano males y la p esencia de leucoci os indica i os de la exis encia de una a ección del apa a o u o-geni al del macho. Es e indispensable examen puede induci al e e i- na io a echaza el espe ma y solici a o o semen al. En el caso hipo é ico -que se da con ecuencia- de que el p opie a io insis a en man ene al animal que había escogido, se impone cla i ica las dudas en cuan o al éxi o de la in e ención. c) Inseminación p opiamen e dicha Hay nume osos au o es (Ha op, 1960; Ande sen, 1969; Knauss, 1982; Fa s ad, 1984) que han desc i o asas bajas de ecundación po inseminación in a- aginal y p econizado po el con a io la inseminación in a-u e- ina. Po una pa e el ca e e ismo del cuello del ú e o es di ícil, incluso en pe íodo de celo, especialmen e en las pe as de azas enanas (o i icio ex emadamen e peque- i10) o gigan es (imposibilidad de inmo iliza el cuello del ú e o po palpacion ansabdo ninal). Si la pe a es ne iosa, y no digamos si es ag esi a, hay pocas posibi- lidades de éxi o. 127 Fig. 19. Posición del animal después de la inseminación a i icial. Tabla I l. Solución de Eosina-Nig osina Realiza en el siguien e o den: 1. Solución ampón de ci a o -Dilui 3 g de ci a o sódico en 100 mI de agua des ilada -Añadi ácido cí ico has a ob ene un pH = 6,8 2. Nig osina al 50% -Ve i 5 g de Nig osina en 100 g de agua des ilada 3. Eosina Nig osina -Disol e 0,4 g de Eosina pol o en 50 ce del ampón y añadi 4 ce de Nig osina al 5% Po o a pa e, en el coi o en la pe a, la inseminación es de ipo aginal y la u gencia de los bulbos e éc iles y del glande del macho, impide el e lejo pos e io del es- pe ma y es imula las con acciones aginales, a o e- ciendo el desplazamien o de los espe ma ozoides en el ú e o. Po odo ello, nos ha pa ecido que los malos esul a- dos ob enidos con una simple je inga de id io, incluso man eniendo le an ado el e cio pos e io de la hemb a du an e 10 minu os (Figs. 18-19), podían es a elaciona- dos con una excesi a dis o sión en e el mon aje u iliza- do y las condiciones na u ales del acoplamien o. Es a es la azón po la que el p o eso ]. P. Mialo yyo mismo, hemos ideado un disposi i o, no auma izan e pa a la pe a, ácil de maneja pa a el e e ina io y que simula las condiciones isiológicas del coi o. Se a a de la pis ola denominada Osi is po el ab ican e ( e . b e- e n.º 84-06-963). - La pis ola Os i is (Fig. 20) Desc ipción. Sus p incipales ca ac e ís icas son las si- guien es: -El cue po blando de la pis ola e i a odo iesgo de auma ismo: su empleo no equie e la u ilización del espéculo. -El pequeño balón in lable si uado en el ex emo an e io de la sonda, debe e i a el e lujo del espe ma y 43