Características y fertilidad del polen en el género Fedia Gaertner (Valerianaceae)

Orsis 11.1996 15-40 Características y fertilidad del polen en el género Fedia Gaertner (Valerianaceae) Nereida Xena de Enrechl, Joel Mathez2 y Arnaud Martin2 1. Universidad Central de Venezuela. Instituto de Biologia Experimental. Centro de Botánica Tropical. Apartado postal 471 14. Los Chaguaramos. Caracas 1041-A. Venezuela 2. Université de Montpellier 11. Institut de Botanique. 163 rue Auguste Broussonet. 34000 Montpellier. France Manuscrit0 recibido en febrero de 1995 Resumen Se presentan 10s principales caracteres morfológicos del polen de todos 10s taxa que componen el género Fedia. Los granos fueron examinados utilizando tanto microscopio de luz como microscopio electrónico de barrido. Todos 10s granos son tricolpados, y la membrana de 10s colpos es siempre granulada-equinada. Los caracteres mh resaltantes son el aspecto triangular de 10s granos en vista polar, la presencia de un halo que rodea las aperturas, la exina siempre microequinulada y con columelas en 10s polos, cortas, robustas y ramificadas en la zona distal. El tamaño de 10s granos es variable y el análisis de varianza realizado sobre este carácter muestra que existen diferencias significativas entre 10s taxa. La presencia de plantas con diferentes proporciones de polen estéril esta limitada a poblaciones localizadas en zonas de contacto entre 10s taxa. Palabras clave: exina, Fedia, fertilidad del polen, morfologia del polen, Valerinnaceae. Abstract. Pollen characteristics and fertility in genus Fedia Gaertner (Valerianaceae) This paper presented the main pollen characters for all the taxa of genus Fedia. The pollen has been examined using light and scanning electron microscopy. All the grains are tricolpate with granular-echinate colpus membrane. The more important features are the triangular shape in polar outline, a characteristic halo surrounding the apertures, the always microechinate exine and the shorted, robusts and branched columellae at the poles. The pollen size is variable and the variance analysis shows significant differences between the taxa. The presence of plants with differents degrees of sterile pollen is limited to populations localized in intertaxa contact zones. Key words: exine, Fedia, pollen fertility , pollen morphology , Valerianaceae. Introducción Los caracteres polínicos de la familia Valerianaceae La morfologia general del polen de las valerianáceas ha sido descrita por varios autores (Blankenhorn, 1978; Clarke, 1978; Clarke & Jones, 1977; Díez, 1987; 16 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Erdman, 1952; Patel & Skavarla, 1979; Verlaque, 1983; Wagenitz, 1956). Recapitulando estas descripciones, se pueden describir 10s granos como isopolares; de tamaño variable (27 a 78 pm en eje polar), P/E de 0.8 a 1.3; tricolpados, presentando un <<halo)) (interpretado por Clarke & Jones, 1977; Clarke, 1978) observable al microscopio Óptico como una banda clara que rodea las aperturas; el margen del colpus siempre delgado y la membrana de la apertura provista de espinas y gránulos de diversos tipos, resistentes a la acetólisis. La exina, siempre tectada, puede ser psilado-perforada y punteada, equinulada (espinas mayores a 1 pm de largo) o microequinulada (espinas de talla menor a 1 pm). En algunos casos, las espinas están colocadas sobre elevaciones de la exina tip0 verruga (verrugoso-equinulada). En cuanto a la estructura de la exina, la zona infiratectal ha sido descrita como formada por un estrato columelar y la nexina constituida exclusivamente por la capa basal de borde interno irregular, estando la endexina siempre ausente. Las columelas son robustas, simples o ramificada~ en el extremo distal. A pesar de la aparente uniformidad del polen de las Valerianaceae, ciertos autores han distinguido varios tipos que perrniten agrupar sus taxa de acuerdo a sus caracteres polinicos. Asi, Clarke (1978) conforma 10s grupos Valeriana y Valerianella; Patel & Skavarla (1979) 10s tipos Nardostachys y Centranthus y Diez (1987) reconoce 10s tipos Centranthus calcitrapae, Fedia cornucopiae, Valeriana tuberosa y Valeriaizella coronata. Clarke (1978) separa sus dos grupos por una característica estructural: la presencia o ausencia de columelas ramificadas. Esta ausencia est6 generalmente acompañada por una exina de espesor uniforme en todo el grano, y una esculturación equinulada y muchas veces verrugosa. Por su parte, Patel & Skavarla (1979), separan sus dos tipos por una caracteristica de la esculturación de la exina: la presencia o ausencia de verrugas. El género que se separa de esta regla es el género Valeriana, considerado en su sentido amplio, es decir incluyendo 10s taxa suramericanos, tratados modernamente como secciones de Valeriana (Eriksen, 1989a; 1989b; Xena de Enrech, 1992; 1993). Por su parte, Diez (1987) trabajando con 10s cuatro géneros y diez especies de valerianáceas presentes en Andalucia occidental, separa el tipo Fedia cornucopiae por su polen triangular en vista polar (contrastando con el polen circular en vista polar del resto de 10s géneros), el tip0 Valeriana tuberosa por su exina verrugosa, y a 10s tipos Centranth~is calcitrapae y Valerianella coronata (exina sin verrugas) por las dimensiones de 10s granos, muchos mis pequeños (eje polar 27-42 pm) de este ultimo taxon. En cuanto a la interpretación evolutiva de estas caracteristicas, Clarke (1978) sugiere ciertas tendencias, como el espesamiento preferencial de la exina en 10s polos, la ramificación de las columelas, el aumento general del espesor de la exina, el aumento del tamaño del grano y la disminución del tamaño de las espinas. Sin embargo, Verlaque (1983) en la familia Dipsacaceae (estrechamente relacionada con la Valerianaceae), constata una tendencia general en la esculturación de la exina a ser cada vez más complicada. Igualrnente Xena de Enrech (1993) constata en ciertas valerianas venezolanas la presencia de complicadas escultu- Polen de Fedia Orsis 11, 1996 17 raciones de la exina, en taxa considerados como avanzados, asi como una relación entre el tamaño del polen y el tamaño noral. Ante estas aparentes contradicciones parece prudente, por el momento, analizar las caracteristicas polínicas de cada taxon de las valerianáceas dentro de su propio contexto. Constitución del género Fedia El género Fedia Gaertn. (emend. Moench.) est6 constituido por pequeñas plantas anuales de invierno, con flores hermafroditas, dicógamas y entomófilas, distribuidas en la cuenca mediterránea occidental y meridional. Está compuesto taxonómicamente, de acuerdo a las últimas revisiones, por tres especies, F. cornucopiae (L.) Gaertn., F. graciliflora Fish. & Meyer y F. pallescens (Maire) Mathez (Mathez, 1984; Xena de Enrech, 1987; Xena de Enrech & Mathez, 1989), las dos últimas comportan varios grupos subespecificos: F. graciliflora subsps. gracilijlora (var. gracilijlora y var. insularis), calycina, diana, snassenorum y sulcata (var. sulcata y var. longijlora); F. pallescens subsps. pallescens e hirsuta. Todos 10s taxa presentan heterocarpia en mayor o menor grado (frutos persistentes y caducos morfológicamente diferentes, sobre la misma planta), y además un polimorfisme intrapoblacional a nivel de 10s frutos caducos que se traduce en la presencia de dos hasta seis <<morfos>> dentro de una misma población. Antecedentes sobre el estudio del polen de Fedia Tanto Clarke (1978) como Patel & Skavarla (1979) incluyeron la especie Fedia cornucopiae en sus estudios sobre el polen de las valerianáceas. Desgraciadamente, la tendencia en ese momento, era la de considerar a Fedia como una especie monotípica, por 10 cua1 es imposible determinar exactamente la identidad del material estudiado por estos autores. De acuerdo con Clarke, el polen de Fedia es de tamaño mediano (54-62 x 43-51 ym); P/E = 1.21-1.29; vista polar triangular con esquinas redondeadas; aperturas largas, ensanchadas al ecuador, y de extremos redondeados; exina espesa en 10s polos (3 ym en el centro del intercolpo, 7 ym en 10s polos); columelas ramificadas, ornamentación equinulada (espinas 1 .O-1 .S ym de alto), sin venugas; aspecto triangular de 10s granos en vista polar, excepcional en la familia. Por su parte Patel & Skavarla señalan (sólo se comentan las informaciones complementarias o contradictorias) la presencia de granos <<grandes>> (61 x 45 ym) y granos <<pequefios>> (50 x 36 ym); ornamentación microequinulada, con espinas agudas; endoapertura ausente. Estas discrepancias pueden interpretarse como consecuencia del estudio de material de origen ge~gr~co y taxonómico diferente, como se ver6 mis adelante. Diez (1987), aunque considera en Andalucia la presencia de dos especies de Fedia (F. cornucopiae y F. scorpioides), éstas son consideradas por 10s autores del presente trabajo como una sola: F. cornucopiae, considerándose a F. scorpioides como un morfo intrapoblacional para el tipo de fruto (Mathez, 1984; Mathez & Xena, 1985a,b; Xena de Enrech, 1987; Xena de Enrech & Mathez, 1990). Este autor reporta para el polen del género entre otras caracteristicas, 18 Orsis 11. 1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez v Arnaud Martin una relación P/E = 1.03-1.25; tamaño grande: P= 48-59 pm, E=42-55 pm; una exina de c. 4 pm de espesor tanto en la mesocolpia como en la apocolpia, con sexina aproximadamente dos veces más gruesa que la nexina; tectum completo; superficie psilada, con perforaciones pequeñas y escasas y con elementos supratectales tip0 espínula (c. 0.75 pm). La Única información palinológica comparativa entre taxa de Fedia anterior al presente trabajo es la presentada por Panelatti (1961), referente al polen proveniente de tres poblaciones de Fedia de Marruecos. Las localidades son Knitra (NE de Rabat), Mehdiya y Ben-Slimane. A partir de las descripciones de este autor, el polen analizado en Mehdiya es más pequeño (E = P = 45-50 pm) y más redondeado que el correspondiente a Knitra (64-60.5 x 63-57 pm). En todos 10s casos las espinas son muy pequeñas (0.5 pm), la membrana de la apertura tiene numerosos gránulos y espinas (siendo éstas diferentes a las del tectum) y el polen es homogéneo dentro de las poblaciones. Los granos procedentes de Ben-Slimane mostraron, según la interpretación de este autor, una supeficie finamente verrugosa. Estas observaciones puntuales sobre el polen de Fedia vistas en conjunto, muestran la necesidad de emprender a la luz de las últimas conclusiones taxonómicas y biosistematicas sobre el género, un estudio detallado sobre las característica~ polínicas del mismo, a nivel poblacional, subespecífico y especifico que resuelva las contradicciones y permita evaluar su potencial en la interpretación de la filogenia del grupo. Este es el objetivo del presente trabajo. Materiales y métodos Material biológico Las anteras utilizadas como fuente de polen de Fedia fueron obtenidas tanto de plantas mantenidas en cultivo en invemadero en el Jardín Botánico de Montpellier, Francia, como de muestras de herbario. En ambos casos el material de origen provenia de las colecciones efectuadas en su mayoría por 10s autores en 34 poblaciones naturales del sur de España, Sicilia y norte de África (Marruecos, Argelia). La localización exacta de estas poblaciones y la precisión sobre si las anteras utilizadas provenían o no de plantas cultivadas se especifica en el anexo 1. La numeración utilizada para señalarlas es la misma que han utilizado 10s autores en otras publicaciones sobre el género. La numeración utilizada para 10s taxa en 10s anexos 2,3 y 4 se corresponde de la siguiente manera: 1 = Fedia cornucopiae (L.) Gaertner 2 = Fedia pallescens (Maire) Mathez subsp. pallescens 3 = Fedia pallescens (Maire) Mathez subsp. hirsuta (Emberger & Maire) Mathez & Xena 4 = Fedia graciliflora Fisch. & Meyer subsp. snassenorum Mathez & Xena 5 = Fedia graciliflora Fisch. & Meyer subsp. graciliflora var. graciliflora var. insularis Mathez & Xena Polen de Fedia Orsis 1 1, 1996 19 6 = Fedia graciliflora Fisch. & Meyer subsp. calycina (Maire) Mathez & Xena 7 = Fedia graciliflora Fisch. & Meyer subsp. sulcata (Pomel) Mathez & Xena var. sulcata var. longiflora Mathez & Xena 8 = Fedia graciliflora Fisch. & Meyer subsp. diana Mathez & Xena Morfologh y estructura de 10s granos de polen Para el examen al microscopio electrónico de barrido (MEB), las anteras obtenidas de plantas en cultivo (material fresco) o de muestras de herbario, fueron acetolizadas segtin la metodologia de Erdtman (1969) modificada y adaptada por el Laboratori0 de Palinologia de la Universidad Autónoma de Barcelona (Espafia), donde se realizó esta parte del trabajo. Los granos se deshidrataron por medio de ácido acético glacial; se centrifugaron a 2500-3000 r.p.m.13 rnin y se decantaron, adicionándose el liquido acetolítico recién preparado: anhídrid0 acético pur0 + H2S04 concentrado (9: 1); después de agitar el preparado se calentó en baño de Maria bajo campana durante 5-15 min hasta ebullición del agua; por Último se filtró el preparado (filtro millipore) y se mantuvo en estufa. Los granos de polen ya acetolizados fueron observados y fotografiados en un MEB de tipo Super-I11 A (I.S.I.), en el Centro de Microscopía Electrónica de la Universidad Autónoma de Barcelona. Las observaciones se centraron en las esculturaciones de la exina y en las aperturas. Se fotografiaron 10s granos en vista polar y ecuatorial, asi como detalles de las espinas y de las aperturas. Los granos partidos por efecto de la centrifugación fueron utilizados para la observación de la estructura interna de la exina. Para el examen al microscopio óptico, las anteras se aplastaron directamente sobre láminas portaobjeto en una gota de glicerina coloreada con verde de metilo. Después de retirar 10s restos de la antera, las preparaciones fueron cubiertas y selladas con glyceel. Asi preparadas, las láminas fueron conservadas en refrigeración por un período de seis meses antes de ser utilizadas. Esta precaución se tom6 en razón de la posibilidad de que ocurriera un aumento de volumen en 10s granos durante algunos meses después de la preparación de las láminas. Las observaciones, dibujos y fotografías fueron efectuadas con un aumento de 450 x. Dimensiones del polen fértil. Análisis de variancia Las medidas de 10s granos se efectuaron con micrómetro ocular. Se determinaron para cada población 10s valores de P (longitud del eje polar) y E (diámetro ecuatorial) en base a una cantidad de medidas variable entre 5 y 45 de acuerdo al material disponible. Sin embargo, siempre se efectuaron más de 50 mediciones en cada taxon, obteniéndose 892 valores de P y E para el género. El espesor de la exina en 10s polos se midió en 162 granos. Sobre estas medidas se efectuó un análisis de variancia de un factor, utilizando el procedimiento GLM del programa SAS (1987) con utilización del test de Tukey. 20 Orsis 11, 1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Estimación de la proporción de polen fértil y de polen estéril En casi todas las preparaciones del polen de Fedia se observa la presencia en proporción variable, de granos estériles, 10s cuales se identificaron: 1. por su tamaño reducido y forma elipsoidal; 2. no colorearse con verde de metilo, y 3. no mostrar poder germinativo en solución de sacarosa a una concentración que provoca la germinación de 10s granos <<normales>>. Para establecer la importancia de esta observación, se realizaron contajes del contenido de polen por flor, en un número de individuos variable en cada población. La proporción fue establec.ida en 135 flores provenientes de 95 individuos, con el objeto de determinar si en las poblaciones con una elevada proporción de polen estéril, esta proporción correspondia a una característica de ciertas flores aisladas, de todas las flores de un individuo preciso, o de todos 10s individuos censados en la población. Para el10 se efectuaron varios análisis de variancia jerárquicos (taxon, población, individuo) utilizando el procedimiento GLM del programa SAS (1987). Resultados y su discusión Morfolog ía La forma de 10s granos fértiles al microscopio Óptico es isopolar, esférica o ligeramente eliptica (PIE = 0.8-1 .l) en vista ecuatorial y triangular en vista polar. Tricolpado, 10s colpos miden entre 30 y 40 ym, y poseen extremidades redondeadas. El halo que rodea las aperturas est6 claramente marcado en todos 10s casos. El estudio morfológico de 10s granos fértiles efectuado por medio de la microscopia electrónica de barrido permite precisar 10s aspectos siguientes: Estructura de la exina (figura 1): tectum continuo; infratectum con columelas cortas, robustas y ramificadas en la zona distal (b,d); superficie interna de la nexina rugosa (a,c); presencia eventual de una zona interna del tectum granulosa (d). Forma de 10s granos: esférica (equiaxial) o ligeramente eliptica (breviaxial o longiaxial) en vista ecuatorial (figura 2 a,b,c,d); claramente triangular en vista polar (figura 3 a,b,c,d). Aperturas (figura 4 a,b,c,d,e): siempre tres, con extremos mk o menos redondeados; membrana de las aperturas provista de esculturaciones de formas variables (gránulos o espinulas), pero siempre diferentes a las espínulas de la exina; margen de la apertura provisto de una hilera de espinulas. Superficie de la exina: ausencia de verrugas; siempre microequinulada (longitud máxima medida en las espínulas = 1 ym); las espínulas siempre agudas (figura 5 a,b,c,d); presencia eventual de una superficie levemente plegada (figura 6 a,b; posible artefacto); presencia eventual de una superficie granulosa (figura 7 a,b). Estos resultados coinciden en su gran mayoria con 10s de la literatura, exceptuando la ausencia en nuestro material de espinas (macroespinas) y de microperforaciones en la superficie de la exina. Se confirma, por 10 tanto, la unifonnidad Polen de Fedia Orsis 1 1, 1996 21 morfológica del polen de Fedia, elirninándose asila posibilidad de utilizar este tip0 de caracteres como diagnósticos en 10s estudios taxonómic'os del género. Grosor de la exina en 10s polos A partir del material preparado para su observación al microscopio Óptico se obtuvieron las medidas de la exina en 10s polos (anexo 2) y las medidas del eje polar P y el diámetro ecuatorial E (anexo 3). Figura 1. Estructura de la exina del polen de Fedia. a, b, c. pob. 128 (F. graciliflora subsp. diana). d. pob. 134 (F. gracilzpora subsp. graciliflora). a, c. Ruptura de la exina en el polo: columelas robustas rarnificadas en el extremo distal; nexina constituida exclusivamente por la capa basal ensanchada y de borde interno irregular. b. Ruptura de la exina fuera del polo: estrato de la capa basal muy delgado. d. Ruptura de la exina en el polo: columelas robustas, rarnificadas en el extremo distal; capa basal ensanchada; presencia de una zona granulosa debajo del tectum. 22 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin En todos 10s taxa de Fedia 10s granos presentan la exina ensanchada en 10s polos. Los valores encontrados oscilan entre 2.4 pm y 4 pm (anexo 2). Estos valores son considerablemente mk pequeños que 10s citados por Clarke (7 pm) y por Patel & Skavarla (6 pm), pero cercanos a 10s valores dados por Panelatti para el material proveniente de Mehdiya: 2.8 pm (F. pallescens subsp. pallescens, para este taxon el valor promedio obtenido en este trabajo es de 3 pm). El análisis de varianza de un factor sobre este carácter muestra una diferencia significativa entre 10s taxa (F [7,175] = 22.03, P<0.001). La prueba de Tukey (nivel de significaciÓn,05) pone en evidencia la presencia de tres grupos de acuerdo con 10s valores promedio. El primer grupo está constituido Únicamente por F. pallescens subsp. hirsuta (2.43 pm); el segundo grupo contiene cinco taxa: F. graciliflora subsp. sulcata (2.9 pm), F. graciliflora subsp. graciliflora (2.98 pm), F. pallescens subsp. pallescens (3 pm), F. graciliflora subsp. diana (3.06 pm) y F. cornucopiae (3.2 pm); el tercer grupo est5 compuesto por F. graciliflora subsp. calycina (3.60 pm) y la subsp. snassenorum (3.64 pm). Figura 2. Forma ligeramente elíptica del polen de Fedia en vista ecuatorial al microscopio de barrido. a. F. cornt~copiae (pob. 78); b. F. gracilifZora subsp. snassenorum (pob. 92); c. F. gracilifloru subsp. gracilifloru (pob. 134); d. F. pallescens subsp. pallescens (pob. 7 1). Polen de Fedia Orsis 1 1. 1996 23 El espesamiento de la exina en 10s polos provoca un aumento del valor P/E de 10s granos de polen en las valerianáceas y dipsacáceas, como ha sido señalado por Verlaque (1984). En el caso particular de 10s taxa de Fedia, igualmente pudo corroborarse una correlación entre el espesor de la exina en 10s polos y el valor de la relación PIE (figura 9). Asi se explica el paso de la condición ligeramente breviaxial a longiaxial en 10s granos de Fedia. Tamaño de 10s granos de polen El tamaño de 10s granos (eje polar) es considerablemente variable, habiéndose obtenido 10s valores más bajos en Fedia pallescens subsp. pallescens (X = 50.1 pm), F. pallescens subsp. hirsuta (X = 51 .S pm) y F. graciliflora subsp. sulcata (X = 53.7 pm). Estos tres taxa se caracterizan por poseer las flores de menor tamaño y, por 10 tanto, con 10s tubos de corola y pistilos más cortos dentro del género (Xena de Enrech & Mathez, 1990). Esta relación positiva entre el tamaño de 10s granos de polen y el de las flores correspondientes, ha sido también observada en ciertas valerianas surameri- Figura 3. Forma triangular del polen de Fedia en vista polar. a. F. cornucopiae (pob. 4); b. F. graciliflora subsp. snassenor-um (pob. 92); c. F. graciliflora subsp. graciliflora (pob. 134); d. F. pallescens subsp. hirsuta (pob. 146). 30 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Pob. 95 - Argelia: 10 km N de Tlemcen, en la ruta a Temouchent. Xena & Mathez 841. 11.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. Pob. 96 - Argelia: Bou-Tlélis, 15 km antes de Anqor, W de Oran. Xena & Mathez 842. 11.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. Pob. 97 - Argelia: Cap Falcon, W de Oran. Xena & Mathez 843. 12.04.1984. Fedia graciliflora subsp. snassenorum. Pob. 98 - Argelia: AYn-el-Turk, W de Oran. Xena & Mathez 882. 12.04.1984. Fedia gracilgora subsp. snassenorum. Pob. 106 - Argelia: alrededores de Thénia, E de Argel. Xena & Mathez 850. 13.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. (C). Pob. 107 - Argelia: N de Tizi-Ouzou, Oued Stita, carretera hacia Tigzirt. Xena & Mathez 85 1. 14.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. (C). Pob. 110 - Argelia: 6 km SW de Draa-elMizan. Xena & Mathez 854. 14.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. Pob. 126 - Argelia: Collo. Xena & Mathez 870. 17.04.1984. Fedia graciliflora subsp. sulcata var. sulcata. (C). Pob. 127 - Argelia: Alrededores de Tamalous, SE de Collo. Xena & Mathez 884.17.04.1984. Fedia graciliflora subsp. sulcata var. longiflora. Pob. 128 - Argelia: Alrededores de Mezghiche, SE de Collo. Xena & Mathez 884. 17.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. (C). Pob. 129 - Argelia: carretera de Constantine a Guelma, 6 km después del Oued-Zenati. Xena & Mathez 872. 17.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana Pob. 130 - Argelia: Carretera entre Constantine y Guelma, 23 km después del Oued- Zenati. Xena & Mathez 873.17.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. (C). Pob. 131 - Argelia: Carretera entre SeraYdi y Annaba. Xena & Mathez 874. 18.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. Pob. 132 - Argelia: Carretera entre Annaba y El-Kala, 12 km después de Ben-EIid. Xena & Mathez 875. 18.04.1984. Fediagraciliflora subsp. diana. Pob. 133 - Argelia: Carretera entre Annaba y El-Kala, 4 km después de Bouteldja. Xena & Mathez 876. 18.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. (C). Pob. 134 - Argelia: Carretera entre El-Kala y la frontera con Tdnez, 5 krn E de El-Kala. Xena & Mathez 877. 18.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. Pob. 135 - Argelia: Alrededores del Lago Tonga, E de El-Kala. Xena & Mathez 878. 18.04.1984. Fedia graciliflora subsp. diana. Pob. 136 - Tdnez: Cap Bon, carretera entre Zaouiet-el-Mgaiz y Sidi-Daoub. Montaud s/n. 07.04.1984. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. graciliflora. Pob. 137 - Italia: Sicilia, vertiente SW del Monte Pellegrino, N de Palermo. Mathez s/n. 06.06.1983. Fedia graciliflora subsp. graciliflora var. insularis. (C). Pob. 140 - Argelia: Mazizo del Djurdjura, 3 km E de Tikjda. 1600 m. Dubuis s/n. 10.06.1982. Fedia graciliflora subsp. calycina. Pob. 141 - Marruecos: Meseta Central, Jbel Mouchchene, vertiente NW, 1 km antes de El-Harcha. 1060 m. Mathez s/n. 02.10.1983. Fedia pallescens subsp. hirsuta. Pob. 142 - Marruecos: Tizi Rnim, alrededores de Beni-Mellal, S del Jbel Tazergount. 750 m. Mathez 7763.05.05.1980. Fedia pallescens subsp. hirsuta. Pob. 143 - Marruecos: Reserva Natural de Mehdiya, lado E del lago. Mathez 7759. 03 .O5 ,1980. Fedia pallescefls subsp. pallescens. (C). Pob. 145 - Marruecos: Atlas Medio, Aguelmane Azigza. Mathez s/n. 11.05.1986. Fedia pallescens subsp. pallescens. Pob. 146 - Marruecos: Gara de Mrirt, 1400 m. C. Raynaud s/n. 1985. Fedia pallescer~s subsp. hirsuta. Polen de Fedia Orsis 11,1996 31 Pob. 148 - Argelia: Mazizo del Djurdjura, SW del Jbel Tigounatine. 1500 m. Dubuis s/n. Fedia gracilzpora subsp. sulcata var. longiflora. Pob. 149. Argelia, Col du Melab, carretera de El-Milia hacia Collo. Dubuis s/n. s/f Fedia graciliflora subsp. sulcata var. sulcata. (C). Anexo 2. Valores obtenidos para el espesor de la exina en 10s polos, en granos de polen provenientes de las diferentes especies y subespecies que conforman el género Fedia (pm): Taxon Pobl. Espesor Taxon -- 3.2 4 3.2 4 3.2 4 3.2 4 3.2 4 3.2 4 3.2 5 3.2 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 2.0 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 2.4 5 2.8 5 2.4 5 2.4 5 2.8 5 3.6 5 3.6 5 4.0 5 4.0 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 3.2 5 4.0 5 4.0 5 4.0 5 4.0 5 3.2 5 3.2 5 , Pobl. Espesor Taxon Pobl. Espesor Taxon 5 137 2.8 8 5 137 2.8 8 5 137 2.8 8 5 137 3.2 8 5 137 3.2 8 6 107 3.6 8 6 107 3.6 8 6 107 4.0 8 6 107 4.0 8 6 140 3.2 8 6 140 3.2 8 6 140 3.2 8 6 140 3.6 8 6 140 3.6 8 6 140 3.6 8 6 140 4.0 8 7 126 2.4 8 7 126 2.4 8 7 126 2.4 8 7 126 2.4 8 7 126 3.2 8 7 126 3.2 8 7 126 3.2 8 7 127 3.2 8 7 127 3.2 8 7 127 3.2 8 7 148 2.4 8 7 148 2.4 8 7 148 2.8 8 7 148 3.2 8 7 148 3.2 8 7 149 2.4 a 7 149 2.8 8 7 149 2.8 8 7 149 2.8 8 7 149 2.8 8 7 149 2.8 8 7 149 2.8 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 8 7 149 3.2 Pobl. Espesor 32 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Anexo 3. Valores obtenidos para 10s ejes polar (P) y ecuatorial (E), medidos en granos de polen pertenecientes a las diferentes especies y subespecies que componen el género Fedia (pm). Taxon Pobl lndlv P E Taxon Pobl lnd~v P E Taxon Pobl Indlv P E Taxon Pobl lnd~v P E 1 4 1 56 58 1 78 1 56 56 2 44 1 50 50 2 143 3 50 50 1 4 1 58 58 1 78 1 58 60 2 44 1 50 50 2 143 3 50 52 1 4 1 58 60 1 78 1 58 60 2 44 1 50 50 2 143 3 50 54 1 4 1 58 60 1 78 1 58 60 2 44 1 50 50 2 143 3 50 54 1 4 1 60 60 1 78 1 60 60 2 44 1 50 50 2 143 3 52 52 1 4 1 60 60 1 78 1 60 60 2 44 1 50 50 2 143 3 52 52 1 4 1 60 60 1 78 1 60 60 2 44 1 50 52 2 143 3 52 54 1 4 1 60 60 1 78 1 60 64 2 44 1 50 52 2 143 3 54 54 1 4 1 60 60 1 78 1 64 60 2 44 1 50 52 2 143 3 54 58 1 4 1 60 60 1 78 1 64 62 2 44 1 50 52 2 143 3 62 62 1 4 1 6060 2 44 1 4044 2 44 1 5252 2 143 3 6670 1 4 1 6060 2 44 1 4244 2 44 1 5252 2 143 3 6670 1 4 1 60 60 2 44 1 42 50 2 44 2 52 52 2 143 3 66 70 1 4 1 60 60 2 44 1 44 46 2 44 2 54 52 2 143 3 68 68 1 4 1 60 60 2 44 1 44 46 2 44 2 54 54 3 86 1 48 48 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 54 54 3 86 1 48 50 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 54 54 3 86 1 48 50 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 54 58 3 86 1 48 52 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 56 56 3 86 1 50 50 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 58 58 3 86 1 50 50 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 60 58 3 86 1 50 52 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 44 2 60 60 3 86 1 52 54 1 4 1 60 60 2 44 1 44 48 2 143 1 44 44 3 86 1 52 56 1 4 1 60 60 2 44 1 44 50 2 143 1 44 46 3 86 1 60 64 1 4 1 60 62 2 44 1 44 50 2 143 1 44 46 3 86 2 48 48 1 4 1 60 62 2 44 1 46 44 2 143 1 44 48 3 86 2 48 50 1 4 1 60 62 2 44 1 46 46 2 143 1 46 46 3 86 2 48 50 1 4 1 60 62 2 44 1 46 46 2 143 1 46 46 3 86 2 50 50 1 4 1 6062 2 44 1 4650 2 143 1 4651 3 86 2 5052 1 4 1 60 64 2 44 1 46 50 2 143 1 48 46 3 86 2 50 52 1 4 1 62 60 2 44 1 46 50 2 143 1 48 48 3 86 2 52 54 1 4 1 62 62 2 44 1 46 50 2 143 1 48 50 3 86 3 50 52 1 4 1 62 64 2 44 1 46 50 2 143 1 50 50 3 86 3 50 52 1 4 1 64 64 2 44 1 48 46 2 143 1 50 50 3 86 3 50 52 1 4 1 64 64 2 44 1 48 48 2 143 1 52 52 3 86 3 50 54 1 4 1 64 68 2 44 1 48 48 2 143 2 50 52 3 86 3 52 52 1 4 1 68 68 2 44 1 48 50 2 143 2 50 54 3 86 3 56 56 1 4 1 70 64 2 44 1 48 50 2 143 2 54 54 3 86 3 56 58 1 4 1 70 68 2 44 1 48 50 2 143 2 54 58 3 141 1 48 50 1 4 2 58 60 2 44 1 48 50 2 143 2 54 58 3 141 1 50 52 1 4 2 60 60 2 44 1 48 50 2 143 2 54 58 3 141 1 50 54 1 4 2 60 64 2 44 1 48 50 2 143 2 56 56 3 141 1 52 54 1 4 2 60 64 2 44 1 48 50 2 143 2 58 58 3 141 1 52 56 1 4 2 6064 2 44 1 4850 2 143 2 5860 3 141 1 5256 1 4 2 6262 2 44 1 5050 2 143 2 5860 3 141 1 5456 1 4 2 64 64 2 44 1 50 50 2 143 2 58 60 3 141 2 48 52 1 4 2 6468 2 44 1 5050 2 143 3 5050 3 141 2 5050 Polen de Fedia Orsis 11,1996 33 Anexo 3. (Continuación) Taxon Pobl. Indiv. P E Taxon Pobl. 3 141 2 50 52 3 145 3 141 2 50 52 3 145 3 141 2 50 54 3 145 3 141 2 50 54 3 145 3 141 2 50 54 3 145 3 141 2 50 54 4 94 3 141 2 52 54 4 94 3 141 2 52 54 4 94 3 141 2 52 54 4 94 3 141 2 52 54 4 94 3 141 2 54 58 4 94 3 141 3 52 54 4 94 3 141 3 52 54 4 94 3 141 3 52 56 4 94 3 141 3 54 56 4 94 3 141 3 54 56 4 94 3 141 3 54 56 4 94 3 141 3 54 58 4 94 3 141 3 56 56 4 94 3 141 3 56 56 4 94 3 141 3 56 56 4 94 3 141 3 58 58 4 94 3 141 3 58 58 4 94 3 141 4 52 52 4 94 3 141 4 52 52 4 94 3 141 4 52 52 4 94 3 141 4 52 52 4 94 3 141 4 52 52 4 94 3 41 4 52 54 4 94 3 141 4 52 54 4 94 3 141 4 54 54 4 94 3 141 4 54 56 4 94 3 141 4 54 58 4 97 3 141 4 54 58 4 97 3 141 4 54 58 4 97 3 141 4 54 58 4 97 3 141 4 56 56 4 97 3 141 4 56 58 4 97 3 142 1 46 48 4 97 3 142 1 48 50 4 97 3 142 1 50 52 4 97 3 142 1 52 54 4 97 3 142 1 54 54 4 97 3 142 1 54 56 4 97 3 145 1 44 50 4 97 3 145 1 46 48 4 97 3 145 1 48 52 4 97 3 145 1 48 52 4 97 Indiv. P E Taxon Pobl. 1 50 52 4 97 1 50 52 4 97 1 50 52 4 97 1 50 54 4 97 1 50 56 4 97 1 54 54 4 97 1 54 54 4 97 1 54 56 4 97 1 56 54 5 95 1 56 56 5 95 1 56 56 5 95 1 58 58 5 95 1 58 60 5 95 1 58 60 5 95 1 60 60 5 95 1 60 60 5 95 1 60 60 5 106 1 60 60 5 106 1 60 60 5 106 2 52 54 5 106 2 54 54 5 106 2 54 54 5 106 2 54 56 5 106 2 54 56 5 106 2 54 58 5 106 2 54 58 5 106 2 56 54 5 106 2 56 54 5 106 2 56 56 5 106 2 56 56 5 106 2 56 58 5 106 2 56 60 5 106 1 50 52 5 106 1 50 52 5 106 1 50 52 5 106 1 50 54 5 106 1 50 54 5 106 1 52 52 5 106 1 52 52 5 106 1 52 54 5 106 1 52 54 5 106 1 54 52 5 106 1 54 54 5 106 1 54 56 5 106 1 56 58 5 106 1 56 58 5 106 1 60 60 5 106 2 52 54 5 106 Indiv. P E Taxon Pobl. Indiv. P E 2 54 54 5 106 3 60 60 2 54 54 5 106 3 60 64 2 54 56 5 106 3 62 60 2 56 54 5 106 3 62 62 2 56 56 5 106 3 62 62 2 58 58 5 106 3 62 62 2 60 58 5 106 3 62 64 2 60 58 5 106 3 64 64 1 54 54 5 106 4 64 66 1 54 56 5 106 4 64 70 1 56 54 5 106 4 66 64 1 56 56 5 106 4 66 66 1 56 56 5 106 4 66 66 1 56 60 5 106 4 68 72 1 60 60 5 106 4 70 70 1 60 62 5 106 4 70 72 1 60 58 5 106 4 72 72 1 60 62 5 134 1 58 60 1 60 62 5 134 1 60 60 16260 5 134 16264 1 62 60 5 134 1 62 64 1 64 62 5 134 1 64 64 1 64 64 5 134 1 64 64 1 64 64 5 134 1 66 64 1 66 62 5 134 1 66 64 1 66 64 5 134 1 66 64 1 66 68 5 134 1 68 70 1 66 70 5 134 2 68 70 1 68 64 5 134 2 70 70 1 68 6+ 5 134 2 70 72 1 68 68 5 134 2 70 72 1 68 68 5 134 2 70 72 2 56 60 5 134 2 70 72 2 58 60 5 134 2 72 72 2 58 60 5 134 2 72 74 2 60 64 5 134 3 58 60 2 62 62 5 134 3 60 60 2 62 62 5 134 3 60 62 2 62 62 5 134 3 60 62 2 62 64 5 134 3 60 62 2 64 64 5 134 3 60 62 2 64 64 5 134 3 60 64 2 64 64 5 134 3 62 64 2 68 66 5 134 3 62 64 2 68 68 5 134 3 62 64 2 68 70 5 134 3 64 64 3 60 60 5 134 3 64 66 3 60 60 5 134 4 54 56 34 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Anexs 3. (Continuación) Taxon Pobl. Ind~v P E Taxon Pobl Ind~v P E 4 56 56 5 136 2 54 56 4 56 58 5 136 2 56 58 4 56 58 5 136 2 56 58 4 56 58 5 136 2 56 60 4 58 58 5 136 2 58 58 4 58 60 5 136 2 58 60 4 58 60 5 136 2 58 60 4 60 60 5 136 2 58 60 4 60 62 5 136 2 58 60 4 62 62 5 136 2 60 60 4 62 62 5 136 2 60 60 5 52 56 5 136 2 62 64 5 54 56 5 136 3 56 56 5 54 56 5 136 3 58 58 5 5458 5 136 3 6064 5 56 58 5 136 3 62 64 5 56 58 5 136 3 66 68 5 56 58 5 136 3 66 70 5 56 60 5 136 3 70 70 5 58 58 5 136 3 70 70 5 5860 5 136 3 7072 1 54 54 5 136 3 70 72 1 54 56 5 136 3 70 72 1 54 58 5 136 3 70 72 1 5656 5 136 3 7274 1 56 56 5 136 3 72 74 1 56 58 5 136 3 76 78 1 56 58 5 136 4 58 60 1 58 58 5 136 4 60 62 1 58 60 5 136 4 62 66 1 5860 5 136 4 6464 1 58 60 5 136 4 64 64 1 60 62 5 136 4 64 66 1 60 62 5 136 4 68 68 1 62 62 5 136 4 70 70 1 62 62 5 136 4 70 72 1 62 64 5 136 5 48 54 1 64 64 5 136 5 52 54 1 64 64 5 136 5 52 54 1 64 64 5 136 5 56 58 1 64 64 5 136 5 56 58 1 64 64 5 136 5 56 60 1 64 66 5 136 5 58 60 1 64 66 5 136 5 60 62 1 84 84 5 136 5 60 62 2 48 52 5 136 5 60 64 2 54 56 5 136 5 62 62 2 54 56 5 136 5 62 64 Taxon Pobl. Indiv. P E Taxon Pobl. Indiv. P E Polen de Fedia Orsis 11,1996 35 Anexo 3. (Continuacidn) I Taxon Pobl. Indiv. P E Taxon Pobl. Indiv. P E Taxon Pobl. Indiv. P E Taxon Pobl. Indiv. P E 36 Orsis 1 1, 1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Anexo 3. (Continuacidn) Taxon Pobl Indlv P E Taxon Pobl Ind~v P E Taxon Pobl Indlv P E Taxon Pobl Ind~v P E - 8 128 2 54 54 8 128 4 56 60 8 130 1 60 60 8 133 2 56 58 8 128 2 54 56 8 128 4 56 60 8 130 1 60 60 8 133 2 56 58 8 128 2 54 56 8 128 4 60 62 8 130 1 60 60 8 133 2 56 58 8 128 2 54 56 8 128 5 54 58 8 130 1 60 60 8 133 2 58 60 8 128 2 5456 8 128 5 5656 8 130 1 6060 8 133 2 5860 8 128 2 54 58 8 128 5 56 56 8 130 1 60 60 8 133 2 58 60 8 128 3 44 54 8 128 5 56 58 8 131 1 58 58 8 133 2 60 62 8 128 3 46 54 8 128 5 56 58 8 131 1 60 60 8 133 2 62 64 8 128 3 5054 8 128 5 6060 8 131 1 6060 8 133 2 6264 8 128 3 5056 8 128 5 6060 8 131 1 6060 8 133 2 6264 8 128 3 5056 8 128 5 6060 8 132 1 5858 8 133 2 6264 8 128 3 5254 8 128 5 6060 8 132 1 6464 8 133 3 5660 8 128 3 5256 8 128 6 4050 8 132 1 6868 8 133 3 5860 8 128 3 52 58 8 128 6 44 46 8 132 1 68 68 8 133 3 60 62 8 128 3 52 58 8 128 6 44 48 8 132 1 68 68 8 133 3 60 62 8 128 3 52 58 8 128 6 44 48 8 132 1 70 70 8 133 3 60 62 8 128 3 52 58 8 128 6 46 48 8 132 1 72 72 8 133 3 60 62 8 128 3 5260 8 128 6 4648 8 133 1 5054 8 133 3 6062 8 128 3 54 58 8 128 6 46 50 8 133 1 52 52 8 133 3 60 62 8 128 3 54 58 8 128 6 46 50 8 133 1 52 54 8 133 3 60 62 8 128 3 54 58 8 128 6 46 50 8 133 1 52 54 8 133 3 60 62 8 128 3 5660 8 128 6 4850 8 133 1 5456 8 133 3 6064 8 128 3 60 60 8 128 6 50 50 8 133 1 54 56 8 133 4 64 64 8 128 3 60 64 8 128 6 50 50 8 133 1 54 56 8 133 4 64 64 8 128 3 7078 8 128 6 5052 8 133 1 5458 8 133 4 6466 8 128 3 8082 8 130 1 5658 8 133 1 5458 8 133 4 6662 8 128 4 4244 8 130 1 5858 8 133 1 5656 8 133 4 6664 8 128 4 44 48 8 130 1 58 60 8 133 1 56 58 8 133 4 66 66 8 128 4 4648 8 130 1 5860 8 133 1 5658 8 133 4 6666 8 128 4 5252 8 130 1 6060 8 133 1 5660 8 133 4 6666 8 128 4 5254 8 130 1 6060 8 133 1 5860 8 133 4 6666 8 128 4 5256 8 130 1 6060 8 133 1 5860 8 133 4 6666 8 128 4 5258 8 130 1 6060 8 133 1 6062 8 133 4 6666 8 128 4 5258 8 130 1 6060 8 133 2 5456 8 128 4 5458 8 130 1 6060 8 133 2 5658 Polen de Fedia Orsis 11,1996 37 Anexo 4. Proporciones de granos de polen fértiles y estériles obtenidos en flores de individuos pertenecientes a las diferentes especies y subespecies que componen el género Fedia. Taxon Pob. Individuo no. Flor no Polen fértil % Polen estéril % Total 1 4 1 1 205 95.35 10 4.65 215 1 4 2 1 213 99.53 1 0.47 214 2 44 1 1 220 98.21 4 1.79 224 2 44 2 1 23 1 99.14 2 0.86 233 2 143 1 1 185 91.58 17 8.42 202 2 143 1 2 252 97.67 6 2.33 258 2 143 2 1 212 94.64 12 5.36 224 2 143 3 1 24 1 80.07 60 19.93 301 3 86 1 1 235 97.51 6 2.49 241 3 86 2 1 235 93.63 16 6.37 251 3 86 3 1 256 99.22 2 0.78 258 3 86 4 1 186 84.16 35 15.84 221 3 141 1 1 200 100.00 O 0.00 200 3 141 1 2 200 99.01 2 0.99 202 3 141 1 3 200 100.00 O 0.00 200 4 94 1 1 217 94.76 12 5.24 229 4 94 2 1 200 100.00 o 0.00 200 4 97 1 1 216 98.63 3 1.37 219 4 97 2 1 200 99.50 1 0.50 201 5 95 1 1 1 O0 100.00 o 0.00 100 5 106 1 1 200 100.00 O 0.00 200 5 106 2 1 287 81.77 64 18.23 351 5 106 3 1 204 99.51 1 0.49 205 5 106 4 1 198 97.06 6 2.94 204 5 106 5 1 209 100.00 O 0.00 209 5 106 6 1 128 100.00 O 0.00 128 5 106 7 1 90 96.77 3 3.23 93 5 106 8 1 128 97.71 3 2.29 131 5 107 1 1 282 98.60 4 1.40 286 5 107 2 1 215 99.54 1 0.46 216 5 107 3 1 220 100.00 O 0.00 220 5 107 4 1 212 99.53 1 0.47 213 5 134 1 1 68 94.44 4 5.56 72 5 134 2 1 22 1 97.79 5 2.21 226 5 134 3 1 70 95.89 3 4.11 73 5 134 4 1 216 100.00 O 0.00 216 5 134 5 1 259 78.96 69 21.04 328 5 134 6 1 239 97.95 5 2.05 244 5 135 1 1 209 100.00 O 0.00 209 5 136 1 1 128 96.24 5 3.76 133 5 136 2 1 212 99.53 1 0.47 213 5 136 2 2 215 99.54 1 0.46 216 5 136 3 1 216 80.00 54 20.00 270 5 136 3 2 232 86.89 35 13.11 267 5 136 4 1 245 84.19 46 15.81 291 5 136 4 2 236 93.28 17 6.72 253 38 Orsis 11,1996 Nereida Xena de Enrech, Joel Mathez y Arnaud Martin Anexo 4. (Continuación) Taxon Pob. Individuo no. Flor no Polen fértil % Polen estiril % Total ! Polen de Fedia Orsis 11,1996 39 Anexo 4. (Continuación) Taxon Pob. Individuo no. Flor no Polen fértil % Polen estéril % Total