Dendritische Zellen bei multiplem Myelom: In vitro-Kultivierung von Dendritischen Zellen aus peripheren mononuklearen Blutzellen von Patienten mit multiplem Myelom
Stefan Peter Pfeiffer
Dr. Med. Dendritische Zellen bei multiplem Myelom: In vitro-Kultivierung von Dendritischen Zellen aus peripheren mononuklearen Blutzellen von Patienten mit multiplem Myelom, die am 04. Juni 1971 in Karlsruhe Reifeprüfung am 30. Oktober 1990 in Kapstadt / Südafrika Studium des Fachbereichs Medizin von WS 1992/93 bis SS 1999 Physik am 29. März 1994 an der Universität Heidelberg Klinische Studien in Heidelberg und London / Großbritannien Praktisches Jahr in Heidelberg und Kapstadt / Südafrika Staatsprüfungen am 12. Mai 1999 an der Universität Heidelberg Promotionsfach: Medizin / Innere Medizin Doktorvater: Priv.-Doz. Dr. Med. H. Goldschmidt Durch Chemotherapie und Dosis-Skalierung konnte die Prognose für Patienten mit Multiple Myelom in den letzten 30 Jahren verbessert werden. Diese Behandlungen führten jedoch zu keinem Überlebensplateau. Neue Therapien werden gesucht, um Patienten mit Multiple Myelom zu heilen. Eine dieser Strategien ist die Auslösung von immunologischen Antitumorreaktionen. Die Neoplastikplastikzellen segmentieren ein monoklonales Immunlobulin, das für Krankheiten typisch ist, und können somit als Zielzellen für das Immunsystem dienen. Für Patienten mit Multiple Myelom
Immuntherapeutische Behandlung ist eine verstärkte Stimulation von T-Zellen
Erfolgreichkeit dieser Aktivierung hängt in hohem Maße von optimalen Maßnahmen ab.
Dendritische Zellen werden als die stärksten
Es ist nicht normal, wenn wir antigen-präsentierende Zellen betrachten. In dieser Studie wurden dendritische Zellen in Flüssigkeitskultur mit GM-CSF, SCF, IL-4 und flk2/flt-3-Ligand kultiviert. Als Ausgangspopulation wurden adherente PBMC von 10 Patienten mit Multiple Myelom und 10 gesunden Blutspendern verwendet. Die Kulturen wurden mit 9,38 2,19x10 Anhänger PBMC begonnen. Durchflusszytometrische Untersuchungen dieser Zellen zeigten T-Lymphozyten (13,35-45,95%) und Monozyten-Makrophagen (76,68-56,55%) in der Kultur. Die Erträge der Kulturen von Patienten und Probanden wurden nach 10 Tagen verglichen. In den Patientenkulturen wurden durchschnittlich 1,97x10 Zellen und in den Probenkulturen 1,83x10 Zellen gezählt. Der statistische Vergleich ergab keinen signifikanten Unterschied (p=0,53). Durchflusszytometrisch konnten bei den Patienten 8,19x10 dendritische Zellen (41% der kultivierten Leukozyten) und bei den Probanden 9,87x10 dendritische Zellen (51% der kultivierten Leukozyten) nachgewiesen werden. Der Vergleich von dendritischen Zellzahlen ergab ebenfalls keinen signifikanten Unterschied zwischen der Patientengruppe und der Probengruppe (p=0.53).
Um die kultivierten dendritischen Zellen von Patienten und Probanden genauer zu untersuchen
Sie wurden durchflusszytometrisch phenotypisiert.
dendritische Zellen als CD1a-positiv, HLA-DR-positiv, CD80-positiv und CD14-negativ
In der mikroskopischen Beurteilung der kultivierten Zellen wurden große
Diese Zellen werden als dendritische Zellen bewertet, mit dendritischen Fortsetzungen und feiner Granulierung.
Die Anzahl mikroskopisch definierter dendritischer Zellen korrelierte mit der Anzahl der
Phänotypisch definierte dendritische Zellen. Die Stimulationskapazität der kultivierten dendritischen Zellen wurde durch ThymidineIncorporation Assays getestet. Diese dendritischen Zellen waren in der Patientengruppe und der Probengruppe effektiver als die PBMC des gleichen Einzelnen als Stimulatoren für die primäre, allogene gemischte Leukozytenreaktion. Ein statistischer Vergleich der Stimulationskapazitäten von Patienten und Probanden-Zellzellen ergab keinen signifikanten Unterschied (p=0.76).
Weiterhin wurde eine Versuchsstruktur dokumentiert, in der mit Myelom-Protein kultiviert
beladene (
pulsed
) dendritische Zellen in vitro autologisch, naive T-Zellen in einem Thymidin-
In diesem In-Vitro-Modell haben wir gezeigt, dass Autologen
Zellen von Myelom-Protein geladenen dendritischen Zellen werden zur Proliferation angeregt
Hsu et al. haben Patienten mit B-Zell-Lymphom erfolgreich immuntherapeutisch mit kultivierten dendritischen Zellen behandelt.
Unsere Ergebnisse zeigen, dass dendritische Zellen aus peripheren Blutzellen von Patienten
Sie können mit mehreren Myelomen kultiviert werden.
Dies wird durch eine starke Stimulationskapazität in Thymidin-Inkorporationsversuchen ausgelöst.
Zellen von Patienten mit Multiple Myelom unterscheiden sich weder in Phänotyp noch in Funktion von dendritischen Zellen, die aus peripheren Blutzellen von gesunden Blutspendern gezüchtet wurden.