Klonale Heterogenität von Actinobacillus actinomycetemcomitans-Isolaten junger
Alexander Macheleidt
Dr. Med. Dent. Klonale Heterogenität von Actinobacillus actinomycetemcomitans - Isolaten junger Erwachsene mit und ohne Parodontitis Geboren am 31.07.1968 in München Reifeprüfung am 27.05.1987 in Langenhagen Studium der Fachrichtung Zahnmedizin von WS 1989/1990 bis SS 1995 Physik am 31.03.1992 an der Universität Bonn Klinische Studien an der Universität Bonn Staatsprüfungen am 13.06.1995 Promotionsfach: Mund-Zähne-Krebsmedizin Doktorvater: Herr Priv.-Doz. Dr. Med. Dent. H.-P. Müller Das Ziel der Arbeit war es, mit verschiedenen Polymerase-Kette-Reaktionen eine biochemisch identifizierte Stammgruppe von A. actinomycetemcomitans genetisch zu bestätigen, genomische Polymorphismen innerhalb dieser Sammlung zu ermitteln und die entstehenden Gruppen auf Assoziationen zum parodontalen Zustand der Träger zu untersuchen.
Die Stämme von
A. actinomycetemcomitans
in einem früheren Teil der Gesamtheit
Es wurden 201 allgemeinmedizinisch gesunde Rekruten im Alter von 18 bis 25 Jahren
Die Bundeswehr ist an zwei Standorten untersucht worden.
Das Ergebnis der Untersuchung ist, dass die Ergebnisse der Untersuchungen zu einer Reihe von Schleimhautsträgern, einer Speichelprobe und einer subgingivalem Plaque beitragen.
Alle Proben wurden auf selektiven Nährstoffen und der biochemischen Wirkung der gewünschten Krankheitserreger ermittelt. Die Reinisolatoren von 51 Probanden wurden in dieser Studie weiter verarbeitet. 25 Stämme von A. actinomycetemcomitans-positiven Patienten mit Parodontitis dienten als Kontrollgruppe. Darüber hinaus wurden drei Referenzstämme des Bakteriums als positive Kontrollen betrachtet und ebenfalls untersucht.
Bei einer Polymerase-Kette-Reaktion mit Artenspezifischen Oligonukleotid-Primieren wurden
Ein weiteres Primärpaar verstärkte Abschnitte der LtxA-Leukotoxization und bestätigte damit wiederum die gestellte Artendiagnose für alle untersuchten Bakterien.
Besonders leukotoxische Stämme von
A. actinomycetemcomitans
sollten durch Amplifikation einer
Der Prozentsatz der Promoterregion in Leukotoxingen wird identifiziert. Für alle Isolate wurde die Speziediagnostik gestärkt. Der Stamm, der bei einem 24-jährigen schwarzen ghanaischen Patienten mit lokalisierter juvenile Parodontitis gewonnen hat, zeigte die als charakteristisch geltende Defekt von 530 Basisepaaren in der Promoterregion.
Die AP-PCR mit drei zufällig ausgewählten Dekamer-Oligonukleotiden ergab für die 79
Insolvate 19 wurden nach verschiedenen Genotypen gesucht.
als die Hälfte
der A. actinomycetemcomitans
- Stämme, zwei weitere zusammen ein weiteres Fünftel. Viele Genotypen wurden nur durch ein Isolat definiert, dies galt auch für den Keim mit der 530 bp Deletion.
Die Gelelektrophoresenmuster dieser AP-PCR-Genotypen wurden auf Ähnlichkeiten untersucht, die
Übereinstimmungen einer hierarchischen Clusteranalyse mit complete
linkage sort
unterzogen. Die entstehenden globulären Clusters sollten wiederum Assoziationen zum Krankheitszustand aufzeigen und eine Beurteilung der genetischen Ähnlichkeit innerhalb einer Gruppe ermöglichen. Bei einem genetischen Abstand von < 0.2 entstanden fünf Clusters, von denen drei die Isolate sowohl von gesunden als auch von parodontalen Erkrankungen umfassten. Eine Gruppe wurde schließlich aus gesunden Isolaten, die andere nur aus Isolaten von Stammkrankheitpatienten.
Die Nullhypothese, dass die Wahrscheinlichkeit, dass bestimmte Klone von
A. act
nomycetemcomitans
unabhängig vom parodontalen Zustand des Trägers, wurde mit
(4)=12,7,
p=0,01 verworfen. Das gesamte Kollektiv war genetisch ziemlich homogen und sehr ähnlich. Obwohl in dieser Hinsicht Trends zu einem häufigerem Auftreten bestimmter Klone in parodontalen Bevölkerungen identifiziert werden konnten, ist es jedoch ziemlich wahrscheinlich, dass das Bakterium in den meisten Fällen nicht als exogener Auslöser der Krankheit, sondern als opportunistischer Keim fungiert, der Veränderungen des ökologischen Gleichgewichts ausnutzt, die durch andere Faktoren induziert werden. Der Krankheitserreger vermutlich zum größten Teil als Komme sal wirkt. Beobachtungen der vorliegenden Studie unterstützen die Hypothese, dass hochtoxische Klone als exogene Krankheitserreger in afrikanischen Stammpersonen möglicherweise eine spezielle Form lokalisierter juveniler Parodontitis auslösen können.